فسفات بافر سالین PBS

توضیحات

فسفات بافر سالین PBS :

فسفات بافر سالین PBS  همان محلول نمکی بافر فسفات است ،

که حاوی سدیم هیدروژن فسفات ، کلرید سدیم و در برخی فرمول ها ،

کلرید پتاسیم و دی هیدروژن فسفات پتاسیم است.

PBS  محلول نمکی بر پایه ی آب است.

توجه شود که بافر PBS  برای استفاده در محلول هایی که دارای کاتیون های دو ظرفیتی هستند,

مانند Zn  و Fe مناسب نیستند زیرا ممکن است باعث ایجاد رسوب شود.

و همچنین اضافه کردن اتانول به  بافر  PBS ممکن است موجب رسوب فسفات در آن شود.

 

تفاوت PBS  با DPBS  :

DPBS یا فسفات بافر سالین دولبکو است که شباهت بسیار زیادی به PBS  دارد و

در تحقیقات زیستی و بیولوژیک به کار  می رود. با این تفاوت که حاوی غلظت کمتری از فسفات است.

DPBS حاوی 8 میلی مول فسفات است درحالی که PBS حاوی 10 میلی  مول فسفات است.

کاربرد :

به طور کلی محلول نمکی فسفات بافر سالین کاربرد های زیادی دارد از جمله :

• از این محلول به علت هم غلظت و هم نوع بودن با مواد بیولوژیکی بدن و نیز غیر سمی بودن آن برای سلول کاربرد بسیاری دارد.
• بافر به ثبات PH محیط کمک می کند و غلظت اسمولاریته و غلظت یونی این محلول با محیط بدن انسان مطابقت دارد ( شرایط ایزوتونیک )
• از ترکیب DPBS وEDTA  برای حذف اتصالات سلولی استفاده می شود .
• برای رقت دادن به مواد نیز به کار می رود.
• برای شست و شو ظروف نیز استفاده می شود.

نکته ی قابل توجه این است که می توانیم از PBS به عنوان محیط انتقال ویروس استفاده کنیم.( به خصوص ویروس های RNA دار )

مواد تشکیل دهنده :

مواد تشکیل دهنده محلول نمکی DPBS ( نمک بافر فسفات دولبکو یا  DPBS محلول بافری ای است که

در کاربرد های بیولوژیک و همچنین برای حفظ سلول ها در یک محدوده فیزیولوژیکی  مناسب به کار می رود.)

دارای ترکیبات مشابهی با PBS است.

به طوری که بعضی از فرمولاسیون ها حاوی پتاسیم و منیزیم نیستند و بعضی دیگر حاوی کلسیم و منیزیم است.

( بسته به این که از بافر برای بافت زنده یا تثبیت نشده استفاده می کنیم یا خیر.

به طوری که نوع فیکس شده به KCL یا Mgcl2 نیاز ندارد.

 

نمک های غیر آلی تشکیل دهنده ی بافر ( میلی گرم_ لیتر ) :

• دی سدیم هیدروژن فسفات : 1150/00
• پتاسیم کلراید : 200/00
• پتاسیم فسفات ، مونوبازیک : 200/00
• سدیم کلراید : 8000/00

 

دستورالعمل آماده سازی :

روش های گوناگونی برای تهیه  PBS  وجود دارد که یکی از آن ها محلول نمکی DPBS  است که دارای ترکیبات مشابه با  PBS  است.

برای آماده سازی 9/6 گرم از پودر محیط کشت را با 900 میلی لیتر آب مقطر سوسپانسیون کنید و اجازه دهید کاملا در آب حل شود.

سپس حجم نهایی محلول را به 1000 میلی لیتر برسانید و در دمای 121 درجه و به مدت 15 دقیقه اتوکلاو کنید.

سپس با استفاده از HCL  و NAOH، PH  محلول را تنظیم کنید .

محلول را بلافاصله با فیلتر غشایی استریل 0/22 میکرون یا کمتر استریل کنید.

در صورت لزوم مکمل های استریل را به صورت اسپتیک اضافه کنید و

مقدار مورد نظر از محلول استریل را داخل ظرف مورد نظر بریزید.

آسان ترین راه برای تهیه ی محلول  PBS  استفاده از قرص یا کیسه های بافر   PBS  است.

لازم به یادآوری است که اگر برای کشت سلولی از PBS استفاده می شود می توانیم با اتوکلاو هم محلول را استریل کرد.

 

مشخصات ظاهری :

به صورت پودرهمگن و به رنگ سفید خامه ای دیده می شود.

شرایط نگهداری :

PBS را می توانیم هم در دمای اتاق و هم در یخچال نگهداری کنیم اما نگهداری در یخچال از رشد باکتری ها جلوگیری می کند.

توجه شود که ماندگاری این محلول به ماهیت مکمل اضافه شده بستگی دارد.

PH مناسب برای نگهداری 7/2 الی 8/7 است.

البته می توانیم به اضافه کردن اسیدکلریدریک یا هیدروکسید سدیم PH مناسب را تنظیم کنیم.

در صورت کدر شدن محلول بهتر است آن را دور بیاندازیم.

آزمایش اسمیر خون محیطی

آزمایش لکه‌گذاری خون (PBS) از انواع آزمایش خون است که به منظور بررسی موارد غیر عادی

در سلول‌های خونی انجام می‌شود.

سه گروه از سلول‌های خون که در این آزمایش مورد بررسی قرار می‌گیرند عبارتند از:

1. گلبول‌های قرمز، که اکسیژن را به سرتاسر بدن هدایت می‌کنند.
2. گلبول‌های سفید، که به بدن در مقابله با عفونت‌ها و بیماری‌های التهابی کمک می‌کنند.
3. پلاکت‌ها، که در روند لخته شدن خون بسیار مهم هستند.

در  آزمایش PBS  اطلاعات به صورت عددی و شکل این سلول‌ها ارائه می‌شوند.

کلیه این اطلاعات به پزشک کمک می‌کند تا بیماری‌های خونی یا سایر بیماری‌های احتمالی در بدن بیمار را تشخیص دهد.

هرگونه مورد غیرطبیعی در تعداد یا شکل سلول‌های خونی می‌تواند بر روند انتقال اکسیژن توسط خون تاثیر بگذارد.

این موارد غیرطبیعی اغلب به دنبال کمبود مواد معدنی و ویتامین‌ها در بدن ایجاد می‌شوند،

اما این شرایط می‌تواند در پی بروز برخی بیماری‌ها، همچون کم خونی داسی شکل، نیز اتفاق بی‌افتد.

گلبول‌های سفید خون جزئی ضروری در سیستم ایمنی بدن محسوب می‌شوند.

سیستم ایمنی شبکه‌ای متشکل از انواع بافت و سلول‌های مختلف است که به بدن در مقابله با

عوامل مهاجم و بیماری‌ها کمک می‌کند.

بالا بودن یا پایین بودن تعداد گلبول‌های سفید می‌تواند نشان‌دهنده وجود برخی بیماری‌های خونی باشد.

بیماری‌هایی که در صورت بروز می‌توانند بر گلبول‌های سفید خون تاثیر بگذارند،

در نهایت منجر به عدم توانایی بدن در حذف یا کنترل عوامل عفونی و یا سایر مشکلات التهابی خواهند شد.

هرگونه مورد غیر عادی در شکل و تعداد گلبول‌های سفید خون می‌تواند نشان‌دهنده یک بیماری مربوط به پلاکت‌های خون باشد.

بیماری‌های مرتبط با پلاکت بر توانایی بدن در لخته کردن خون تاثیر می‌گذارند.

توانایی بدن در لخته کردن خون به هنگام بروز خون‌ریزی بسیار حیاتی است و از خروج بیش از اندازه خون از بدن جلوگیری می‌کند.

بیماری‌های پلاکتی اغلب زمانی بروز می‌کنند که بدن به دلایلی شروع به تولید بیش از حد پلاکت می‌کند.

نتایج آزمایش PBS

زمانی که تعداد سلول‌های خونی و شکل ظاهری آن‌ها طبیعی باشد گفته می‌شود لکه‌گذاری خون نرمال است.

اما چنانچه در اندازه (بزرگی و کوچکی)، شکل، رنگ و تعداد سلول‌های خونی موارد غیرطبیعی مشاهده شود

گفته می‌شود لکه‌گذاری خون غیرطبیعی بوده است.

نتایج غیرطبیعی براساس بیماری یا مشکلی که سلول‌های خونی را تحت تاثیر قرار داده با یکدیگر متفاوت هستند.

جهت مشاهده قیمتها روی جمله : لیست قیمت گیبکو کلیک نمایید.

همچنین برای  کسب اطلاعات بیشتر به سایت GIBCO مراجعه فرمایید.

جهت اخذ مشاوره و خرید تجهیزات آزمایشگاهی با کارشناسان ما در هلدینگ KTG تماس حاصل بفرمایید.