آنزیم تریپسین

توضیحات

آنزیم تریپسین و نقش آن

آنزیم تریپسین و نقش آن در کشت سلولی, همچنین مکانیسم اثر این آنزیم را در اینجا ملاحظه می فرمایید.

آنزیم یک نوع «کاتالیست» (catalyst) بیولوژیکی است که سرعت واکنش شیمیایی را در موجود زنده تنظیم می‌کند.

اکثر آنزیم‌ها پروتئین‌ها هستند؛ اگرچه برخی نوکلئیک اسیدها به نام ریبوزوم‌ها هم قادر به انجام فعالیت کاتالیز محسوب می‌گردند.

تریپسین چیست و مکانیسم اثر این آنزیم چگونه است؟

از تریپسین برای چه مواردی استفاده می‌کنیم؟

تریپسین چگونه به کشت سلولی کمک می‌کند؟

نقش آنزیم ها در کشت سلولی چیست؟

آنزیم‌ها برای حفظ حیات ضروری هستند؛ زیرا اکثر واکنش‌های شیمیایی در سلول‌های بیولوژیکی مانند هضم غذا،

خیلی آرام اتفاق می‌افتند یا منجر به محصولات مختلفی بدون فعالیت آنزیم‌ها می‌گردند.

تا حالا با خودتان فکر کرده اید که اگر آنزیم ها نبودند چه اتفاقی می‌افتاد؟

قصد داریم امروز نگاه اجمالی به آنزیم تریپسین در علم زیست شناسی بیندازیم و با جنبه های مختلف این آنزیم آشنا شویم.

استفاده‌ی وسیعی از آنزیم های زیستی در کشت سلولی کمک بسیاری به پیشرفت علم زیست شناسی کرده

به‌گونه ای که اگر این آنزیم ها نبودند عملا خیلی از کار های زیستی امکان پذیر نبود.

برای شروع بهتر است از خود آنزیم تریپسین و ساختار مربوط به آن شروع کنیم. پس با ما تا انتهای مقاله همراه باشید.

آنزیم های پروتئولیتیک مختلفی برای جدا کردن سلول ها از بستر چسبنده در کشت سلولی استفاده می‌‌شودکه

یکی از کاربردی ترین آن ها آنزیم تریپسین است.

آنزیم تریپسین و نقش آن 

سلول های چسبنده و نیمه چسبنده را به کمک تریپسین EDTA آزاد کرده و

در حجم کمی از محیط کشت به حالت سوسپانسیون درآورید.

سلول های چسبنده‌ی شناور و سلول هایی را که به صورت توده سلولی رشد می‌کنند سانتریفیوژ کرده و

در حجم اندکی از محیط کشت به صورت سوسپانسیون درآورید.

البته آنزیم های پروتئینی بسیاری وجود دارد که در فرایند کشت سلولی استفاده می‌شود مانند کلاژناز، پیروناز

و تریپسین که ماتریکس خارج سلولی را هضم می‌کند و با این کار باعث جدا شدن سلول مورد نظر از بافت جامد شد.

تریپسین از مهم ‌ترین آنزیم های بیولوژیکی (سرین پروتئاز) است که در فرایند های بیولوژیکی کاربرد دارد.

تریپسین آنزیم پروتئینی است که در سیستم گوارشی بسیاری از مهره‌داران تولید و قادر به فعالیت است.

از مهم ترین کاربرد های تریپسین می‌توان به جدا کردن سلول ها از بافت اشاره کرد.

در آزمایشگاه های کشت سلولی، طی فرایند پاساژ سلولها از تریپسین استفاده می‌کنیم.

به‌گونه ای که تریپسین جهت جدا کردن سلول های چسبنده از دیوار ظرف کشت سلولی بکار می‌رود.

سلول های کشت داده شده از نظر مورفولوژیک به یکی از دو شکل معلق یا چسبان دیده می‌شود که

سلول های چسبان به صورت تک لایه به فلاسک کشت سلولی چسبیده و رشد می‌کنند.

در مورد این سلول ها اتصال به بستر یکی از نیاز های اساسی سلول است و

چنین سلول هایی فقط پس از اتصال مناسب شروع به تکثیر می‌کنند.

برای رده های سلولی بسیار چسبنده، از تریپسین 0/25 درصد تا 2/5 درصد استفاده می‌کنیم.

درحالیکه مطالعاتی که به یکپارچگی پروتئین سطح سلول نیاز دارند، از محلول در غلظت های پائین تر استفاده می‌شود.

در آزمایشگاه ها می‌توان براساس انواع و کاربرد سلول ها، تریپسین را با ترکیبات و غلظت های مختلفی مورد استفاده قرارداد.

یکی از کار های مطلوب برای افرایش کارایی آنزیم تریپسین افزودن EDTA  به محیط کشت مورد نظر است.

بطوریکه با این کار باعث صرفه‌جویی در مصرف آنزیم و همچنین کاهش مدت قرار گیری سلول ها در معرض آنزیم شده و

از آسیب احتمالی وارده بر سلول جلوگیری می‌کند.

خوب حالا که تا اینجا همراه ما بودید و با تریپسین آشنا شدید وقت آن رسیده که

نکاتی را برای استفاده از تریپسین بیان کنیم که دانستن آن خالی از لطف نیست.

دمای مطلوب برای آنزیم تریپسین 37 درجه است و بنابراین باید تریپسین را قبل از استفاده گرم کنیم تا بتواند اثر خود را بگذارد.

بسیاری از سلول ها توانایی تحمل آنزیم تریپسین را دارند ولی با این حال مطلوب است که

از تریپسین در مطالعات پروتئین ها و کشت های سلولی سرم دار استفاده نشود.

سرم ها باعث غیر فعال شدن آنزیم تریپسین می‌شود. لذا حتما بایستی قبل از افزودن تریپسین،

لایه‌ی سلولی را با بافر فسفات فاقد کلسیم و منیزیم شستشو داده تا سرم احتمالی موجود در محیط کشت حذف شود.

البته برای غیر فعال کردن تریپسین از پروتئین های مهار کننده  مانند تریپسین سویا هم می‌توان استفاده کرد.

درمورد ساختار تریپسین می‌توان به داشتن c لیزین و آرژنین در قسمت انتهایی اشاره کرد.

انکوباسیون طولانی مدت با غلظت بالای تریپسین با از بین بردن پروتئین های سطح سلول به سلول های مورد نظر آسیب می‌رساند.

مشخصات ظاهری:

آنزیم تریپسین محلول و بی رنگ در حجم های ml 500 و ml 100 وجود دارد.

بعنوان کلام پایانی این را همیشه به یاد داشته باشیدکه پیشرفت علوم زیستی منجر به پیشرفت علم پزشکی و

در نتیجه پیشگیری و یا درمان خیلی از بیماری ها می‌شود.

امروزه تکنیک کشت سلولی به صورت خیلی پیشرفته در آزمایشگاه های کشور قابل انجام است که

کمک بسیار زیادی به پیشرفت علم پزشکی کرده است و حتی در برخی از موارد موجب جلوگیری از گسترش بیماری شده است.

و در آخر ممنون که تا انتهای مقاله ما را همراهی کردید. ما بی‌صبرانه منتظر نظراتتان خواهیم بود.

به خاطر داشته باشید که با  بیان پیشنهاداتتان ما را در بهبود عملکردمان کمک کنید.

برای کسب اطلاعات بیشتر به وبسایت capricorn مراجعه نمایید.

هلدینگ KTG ارائه‌دهنده مجموعه‌ای از تجهیزات آزمایشگاهی با بهترین کیفیت و نازل‌ترین قیمت است.

جهت اخذ مشاوره و خرید تجهیزات آزمایشگاهی با کارشناسان ما در هلدینگ KTG تماس حاصل بفرمایید.