هلدینگ KTG ارائه دهنده انواع دستگاه الایزا ریدر واشر آلمانی می‌باشد. لطفا جهت اخذ مشاوره و استعلام قیمت با کارشناسان شرکت کیمیا طب گستر تماس حاصل فرمایید. تضمین کیفیت، ایمنی در محیط کار، اطمینان از خدمات و ضمانت پس از فروش و قیمت مناسب سر لوحه و شعار ماست. تعمیر و کالیبراسیون کلیه دستگاه های آزمایشگاهی را از ما بخواهید. برای اطلاع از قیمت انواع  تجهیزات الایزا لطفا به صفحه لیست قیمت این محصول مراجعه بفرمایید. شرکت کیمیا طب گستر آماده ارائه انواع خدمات به شما مشتریان گرامی است. برای کسب اطلاعات بیشتر با کارشناسان ما تماس بگیرید.

تئوری روش ایمنی سنجی رادیویی

تئوری روش ایمنی سنجی رادیویی اولین بار سال 1960 توسط Rosalyn Sussman Yalow و Solomon Berson مطرح شد. از آنجایی‌که رادیواکتیویته خطرات زیستی داشت، پیشنهاد امن تر و ایمن تری مبنی بر جایگزینی سیگنال های غیر رادیو اکتیو به جای سیگنال های رادیو اکتیو ارائه شد. وقتی یک آنزیم مشخص (مانند پر اکسیداز) با زیر لایه مناسب واکنش می دهد، منجر به تغییر رنگ آن می‌شود که می تواند به عنوان سیگنال استفاده شود. البته باید تناسب بین سیگنال و وجود آنتی‌بادی یا آنتی ژن تعیین می‌شد که این پروسه توسط Stratis Avrameas و G.B. Pierce انجام شد. در سال 1966 توسط Wide و Porath این روش تکمیل تر شد.

و در سال 1971 Peter Perlmann و Eva Engvall نهایتا به روش الایزا به شیوه امروزی دست پیدا کردند. الایزا امروزی مزایای زیادی نسبت به روش‌های ایمنی سنجی رادیویی دارند. از جمله عدم وجود خطر تشعشع، امکان اتوماسیون، امکان افزایش حساسیت روش، عمر طولانی کیت های آنزیمی، سرعت خوانش بالا و قیمت ارزان‌تر دستگاه‌ها و معرف ها. تست الایزا با روش‌های گوناگونی انجام می‌شود که به صورت کلی به دو دسته ELISA مستقیم و غیر مستقیم تقسیم بندی می‌شود.

روش الایزا مستقیم 

در روش مستقیم آنتی ژن یا آنتی‌بادی مورد نظر به طور مستقیم بر سطح فاز جامد پوشش داده می شود و سپس آنتی‌بادی یا آنتی ژن مکمل نشاندار شده آن به سیستم اضافه می‌شود. با آنالیز سیگنال تولید شده می‌توان پی به وجود آنتی ژن یا آنتی بادی مورد نظر در نمونه برد. این روش ارزش تشخیصی چندانی نداشته و بیشتر کاربرد تحقیقاتی دارد.

روش الایزا غیر مستقیم

در روش غیر مستقیم سرم رقیق شده به آنتی ژن های پوشش داده شده در فاز جامد اضافه می شود، سپس نمونه را به آن اضافه کرده و پس از گذشت زمان انکوباسیون و یک مرحله شستشو، آنتی هیومن گلوبولین نشاندار شده با آنزیم به چاهک اضافه می شود.

این روش برای تعیین آنتی بادی اختصاصی یا تیتراسیون آنتی بادی در سرم استفاده می‌شود. ‌ روش های الایزا ساندویچ و الایزا رقابتی یا مهاری از دیگر انواع متداول این تکنیک هستند. روش ساندویچ که متداول‌ترین روش الایزا  است، یک آنتی ژن در بین دو آنتی بادی اختصاصی قرار می گیرد. روش های رقابتی نیز بر پایه رقابت دو آنتی ژن یا دو آنتی بادی برای اتصال لیگاند با مقدار محدود استوار است. اگر اضافه کردن هردو آنالیت به سیستم همزمان انجام شود، روش را رقابتی می نامند ولی چنانچه ابتدا آنالیت اضافه شده و پس از یک دوره زمانی انکوباسیون آنالیت نشاندار اضافه گردد روش را مهاری می نامند.

مراحل انجام یک آزمون الایزا

مراحل انجام یک آزمون الایزا  که تقریبا در تمام انواع آن مشترک است عبارت است از:

1) پوشش دهی، که به معنی جذب یک آنتی‌ژن یا آنتی‌بادی با سطوح جامد است.
2) اضافه کردن نمونه‌های مورد آزمایش.
3) گذشت مدت زمان کافی برای انجام واکنش که به اصطلاح انکوباسیون واکنشگرها نامیده می شود.
4) انجام عمل شستشو توسط واشر ELISA ، به منظورجدا کردن واکنشگرهای متصل شده و واکنش داده از واکنشگرهای آزاد و متصل نشده ‌.
5) اضافه عوامل لینک شده با آنزیم.
6) مجددا طی مدت زمان انکوباسیون برای واکنشگرها ‌.
7)استفاده مجدد از واشر ELISA جهت انجام عمل شستشو ‌.
8) افزودن زیرلایه آنزیم جهت تشخیص واکنش دهنده‌ها.
9) طی زمان انکوباسیون.
10) اتمام واکنش آنزیمی توسط متوقف کننده‌ها و خوانش دانسیته نوری به دست آمده توسط خواننده .

مرحله ی اول :

شستشوی پلیت که ممکن است با استفاده از میکروپلیت واشر انجام شود.

مرحله ی دوم :

استفاده از یک توزیع کننده مایع ( سمپلر )

مرحله ی سوم :

پلیت در انکوباتور قرار داده می شود که دارای دمای کنترل شده بوده و واکنش ها در آن محل انجام می شود . بسته به نوع 1و 2و 3 ممکن است چندین بار تکرار شوند تا این که معرف های اضافه شده واکنش ها را کامل کند. سرانجام وقتی تمام مراحل انکوباسیون کامل شد پلیت به الایزا ریدر منتقل شده و سپس با قرائت جذب نوری نمونه ها نتیجه ی آنها مشخص می شوند .

انجام روش الایزا از لحاظ بیوشیمیایی:

چاهک های پلیت با آنتی بادی و یا آنتی ژن پوشیده شده اند. نمونه هـا، کنترلهـا و استانداردهـا به چاهکها افزوده شـده و متناسب با ویژگیهای آزمایش در درجه حرارت بین دمای اتاق و C°37  برای مدت زمان مشخص انکوبه میشوند. در این مرحله آنتی بادی ها و آنتی ژن ها به یکدیگر اتصال پیدا میکنند و در این مرحله تعداد اتصال ها بسیار دارای اهمیت میباشد. بعد از انکوباسیون، اتصالات غیر اختصاصی و آنتی ژن ها و آنتی بادی های آزاد توسط سیستم شستشو از محیط خارج می شوند. سپس آنتی بادی دوم” که کونژوگه نام دارد اضافه می شود.

این آنتی بادی دارای با یک آنزیم نشانه گذاری شده است که با واکنش با یک سوبسترا درمراحل بعد سبب تغییر رنگ می شود. در ادامه، مرحله دوم انکوباسیون آغاز می شود که در آن کونژوگه به کمپلکس آنتی ژن – آنتی بادی در چاهک ها متصل می شود. بعد از انکوباسیون، چرخه جدید شستشو آغاز می شود تا کونژوگه آزاد از چاهک خارج شود. سوبسترا اضافه می شود. و با آنزیم نشانگذاری شده واکنش میدهد که این عمل سبب ایجاد رنگ آبی میگردد. زمانی که انکوباسیون کامل شد، یک معرف افزوده می شود تا واکنش بین آنزیم و سوبسترا متوقف شده و

تغییر بیشتری در رنگ به وجود نیاید. این معرف معمولا یک اسید رقیق است که سبب تغییر رنگ از آبی به زرد میگردد. در نهایت پلیت با خوانشگر که همان دستگاه الایزا ریدر می باشد خوانده می شود و نتایج به دست آمده نمایانگر حضور آنتی ژن یا آنتی بادی و مقدار آن در نمونه است.

لطفا برای مشاهده صفحه قیمت تجهیزات آزمایشگاهی روی لینک کلیک نمایید.

هلدینگ KTG ارائه دهنده ی انواع دستگاه های مورد نیاز آزمایشگاه هاو صنایع مختلف می باشد. گروه K.T.G با هدف تضمین کیفی و رضایتمندی مشتریان،کالاهای مورد درخواست را از کمپانی های معتبر داخلی و همچنین کشور های اروپایی، آمریکایی و آسیایی بر اساس استاندارد مورد تایید و کیفیت بالا ، تهیه و ارائه می دهد. تعمیر و کالیبراسیون تجهیزات آزمایشگاهی خود را به متخصصین و کارشناسان ما بسپارید.