هلدینگ KTG | خرید تجهیزات آزمایشگاهی و تحقیقاتی

شیکر الایزا چیست؟

شیکر الایزا چیست؟ ابزاری است در آزمایشگاه که در تست الایزا برای تکان دادن میکروپلیت ‌ها

به منظور مخلوط کردن محلول  آنها به کار می‌رود و با حرکت سریع باعث اختلاط معرف‌ها و پیشرفت واکنش می‌شود.

تست الایزا روش ایمونولوژیکی رایج برای اندازه گیری آنتی‌ژن، آنتی‌بادی، پروتیین‌ و گلیکوپروتیین

در نمونه‌های خون است و این تست برای تشخیص آنتی‌بادی‌های در ارتباط با بیماری ‌و عفونت‌ها به کار می‌رود.

آزمون الایزا بر روی پلیت 96 خانه انجام می‌شود و هر کیت الایزا یک آنتی‌ژن خاص را بررسی می‌کند.

همان طور که که می‌دانید تکان خوردن خوب میکروپلیت‌ها بخش خیلی مهم در تست الایزا است.

استفاده از روتاتور به جای شیکر منجر به خوب  مخلوط نشدن معرف‌ها‌، پیشرفت کند واکنش و

خطای زیاد آزمایش می‌شود همچنین تکان زیاد میکروپلیت‌ها باعث آلودگی چاهک‌ها می‌شود.

در ادامه به مشخصات فنی انواع شیکر الایزا می‌پردازیم :

شیکر الایزا چیست؟

کمپانی BOECO آلمان تولید کننده انواع شیکر‌های آزمایشگاهی است.

شیکر الایزا چیست؟

مشخصات فنی دستگاه شیکر الایزا PST60 BOECO در جدول ذیل شرح داده شده :

الایزا

الایزا  (ELISA) مخفف عبارت Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

 یک روش آزمایشگاهی بیوشیمیایی ساده با حساسیت بسیار بالا است که

امکان آنالیز تعداد زیادی نمونه را به صورت همزمان فراهم می کند.

این روش در ایمونولوژی (ایمنی شناسی) برای تشخیص وجود یک آنتی بادی یا آنتی ژن در

نمونه مورد آزمایش استفاده می شود که عموما به عنوان ابزاری تشخیصی در پزشکی و پاتولوژی و

همچنین تست کنترل کیفیت در بسیاری از صنایع کاربرد دارد.

الایزا بر پایه اندازه گیری کمپلکس رنگی آنتی‌ژن و آنتی‌بادی استوار است.

به این ترتیب که نمونه مورد آزمایش با مقدار نامشخصی آنتی ژن روی فاز جامد (معمولا پلیت پلی استیرن) ریخته می شود،

سپس آنتی بادی بازیابی اضافه می‌شود تا با آنتی ژن واکنش داده و ترکیبی ایجاد کند.

آنتی بادی بازیابی با آنزیم پیوندی کووالانسی برقرار می کند.

بین هر مرحله پلیت با محلول پاک کننده ملایمی شسته می شود تا هر پروتئین یا آنتی بادی باقیمانده شسته شود.

پیش از آخرین مرحله شستشو، پلیت با اضافه کردن زیر لایه آنزیمی کشت داده می شود و ماده رنگی تولید می‌شود.

طول موج رنگ به دست آمده توسط یک دستگاه اسپکتروفتومتر قرائت شده و ثبت می‌شود که

این طول موج معرف حضور یک آنتی‌بادی یا آنتی‌ژن و نیز غلظت آن است.

در الایزا های قدیمی تر زیرلایه رنگ‌زا به کار گرفته می‌شد در حالیکه در تست های جدیدتر زیرلایه های فلوروژنیک با

حساسیت بسیار بالاتر مورد استفاده قرار می گیرد.

امروزه الایزا یکی از قدرتمند ترین روش های آزمایشگاهی برای پی بردن به اختلالات سیستم ایمنی است،

این تست به منظور پی بردن به آنتی‌ژن ناشی از ارگانی عفونی در بدن یا مواد غیر نرمالی که

معرف برخی بیماری‌ها است انجام می شود.

همچنین آنتی بادی‌هایی که در پاسخ به برخی عفونت‌ها یا بیماری‌ها به‌وجود آمده نیز توسط این تست قابل تشخیص هستند.

تست الایزا  اولین آزمایش متداول در غربال‌زنی HIV است.

در تست الایزا  سرم فرد 400 بار رقیق شده و به صفحه ای که حاوی آنتی‌ژن HIV است اضافه می‌شود.

اگر آنتی بادی HIV در سرم وجود داشته باشد، به این  آنتی‌ژن های HIVمی چسبد.

سپس به منظور از بین بردن دیگر اجزا سرم، پلیت شستشو داده می شود.

یک “آنتی بادی ثانویه” ساخته شده مخصوص (یک آنتی بادی چسبیده به آنتی بادی دیگری) به پلیت اعمال شده و

شستشوی دیگری انجام می‌شود.

این آنتی بادی ثانویه به صورت شیمیایی به آنزیم از پیش تهیه شده می‌چسبد.

این‌بار زیر لایه ای برای آنزیم اعمال شده و توسط آنزیم کاتالیز می‌شود که منجر به تغییر رنگ در فلورسانس می شود.

نتایج الایزا  به صورت عددی گزارش می‌شود.

بحث‌انگیزترین وجه این تست تعیین نقطه برش بین نتایج مثبت و منفی است.

علاوه بر آزمایش HIV از ELISA برای آزمایش بیماری‌هایی چون هپاتیت،

تب استخوان‌شکن، leptospirosis ، عفونت انگلی، تبخال، سرخجه و

دیگر عفونت‌های ویروسی و باکتریایی استفاده می‌شود.

پیش از پیدایش روش الایزا ، تنها گزینه برای انجام سنجش ایمنی،

ایمنی سنجی رادیویی بود، که از آنتی ژن ها و آنتی بادی هایی که به صورت رادیواکتیو ممیز شده بودند استفاده می‌شد.

در این روش در صورت وجود آنتی بادی یا آنتی‌ژنی خاص،

رادیواکتیویته سیگنالی تولید می‌کرد.

تئوری روش ایمنی سنجی رادیویی اولین بار سال 1960 توسط Rosalyn Sussman Yalow و Solomon Berson مطرح شد.

از آنجایی‌که رادیواکتیویته خطرات زیستی داشت، پیشنهاد امن تر و ایمن تری مبنی بر

جایگزینی سیگنال های غیر رادیو اکتیو به جای سیگنال های رادیو اکتیو ارائه شد.

وقتی یک آنزیم مشخص (مانند پر اکسیداز) با زیر لایه مناسب واکنش می دهد،

منجر به تغییر رنگ آن می‌شود که می تواند به عنوان سیگنال استفاده شود.

البته باید تناسب بین سیگنال و وجود آنتی‌بادی یا آنتی ژن تعیین می‌شد که

این پروسه توسط Stratis Avrameas و G.B. Pierce انجام شد.

در سال 1966 توسط Wide و Porath این روش تکمیل تر شد.

و در سال 1971 Peter Perlmann و Eva Engvall نهایتا به روش الایزا به شیوه امروزی دست پیدا کردند.

الایزا امروزی مزایای زیادی نسبت به روش‌های ایمنی سنجی رادیویی دارند.

از جمله عدم وجود خطر تشعشع، امکان اتوماسیون، امکان افزایش حساسیت روش،

عمر طولانی کیت های آنزیمی، سرعت خوانش بالا و قیمت ارزان‌تر دستگاه‌ها و معرف ها.

تست الایزا با روش‌های گوناگونی انجام می‌شود که به صورت کلی به دو دسته ELISA مستقیم و غیر مستقیم تقسیم بندی می‌شود.

روش مستقیم 

در روش مستقیم آنتی ژن یا آنتی‌بادی مورد نظر به طور مستقیم بر سطح فاز جامد پوشش داده می شود و

سپس آنتی‌بادی یا آنتی ژن مکمل نشاندار شده آن به سیستم اضافه می‌شود.

با آنالیز سیگنال تولید شده می‌توان پی به وجود آنتی ژن یا آنتی بادی مورد نظر در نمونه برد.

این روش ارزش تشخیصی چندانی نداشته و بیشتر کاربرد تحقیقاتی دارد.

روش غیر مستقیم 

در روش غیر مستقیم سرم رقیق شده به آنتی ژن های پوشش داده شده در فاز جامد اضافه می شود،

سپس نمونه را به آن اضافه کرده و پس از گذشت زمان انکوباسیون و یک مرحله شستشو،

آنتی هیومن گلوبولین نشاندار شده با آنزیم به چاهک اضافه می شود.

این روش برای تعیین آنتی بادی اختصاصی یا تیتراسیون آنتی بادی در سرم استفاده می‌شود. ‌

روش های الایزا ساندویچ و الایزا رقابتی یا مهاری از دیگر انواع متداول این تکنیک هستند.

روش ساندویچ که متداول‌ترین روش الایزا  است،

یک آنتی ژن در بین دو آنتی بادی اختصاصی قرار می گیرد.

روش های رقابتی نیز بر پایه رقابت دو آنتی ژن یا دو آنتی بادی برای اتصال لیگاند با مقدار محدود استوار است.

اگر اضافه کردن هردو آنالیت به سیستم همزمان انجام شود، روش را رقابتی می نامند ولی

چنانچه ابتدا آنالیت اضافه شده و پس از یک دوره زمانی انکوباسیون آنالیت نشاندار اضافه گردد روش را مهاری می نامند.

شیکر الایزا چیست؟

مراحل انجام یک آزمون الایزا  که تقریبا در تمام انواع آن مشترک است عبارت است از:

1) پوشش دهی، که به معنی جذب یک آنتی‌ژن یا آنتی‌بادی با سطوح جامد است.
2) اضافه کردن نمونه‌های مورد آزمایش.
3) گذشت مدت زمان کافی برای انجام واکنش که به اصطلاح انکوباسیون واکنشگرها نامیده می شود.
4) انجام عمل شستشو توسط واشر ELISA ، به منظورجدا کردن واکنشگرهای متصل شده و واکنش داده از واکنشگرهای آزاد و متصل نشده ‌.
5) اضافه عوامل لینک شده با آنزیم.
6) مجددا طی مدت زمان انکوباسیون برای واکنشگرها ‌.
7)استفاده مجدد از واشر ELISA جهت انجام عمل شستشو ‌.
8) افزودن زیرلایه آنزیم جهت تشخیص واکنش دهنده‌ها.
9) طی زمان انکوباسیون.
10) اتمام واکنش آنزیمی توسط متوقف کننده‌ها و خوانش دانسیته نوری به دست آمده توسط خواننده .

شرکت کیمیا طب گستر انواع تجهیزات عمومی و شیکرهای الایزا، میکروپلیت، ارلن و بالن ارائه می‌دهد.

مجموعه KTG تمامی محصولات خود را با گارانتی معتبر در اختیار مشتریان گرانقدر خود قرار می‌دهد.

برای هر‌گونه پرسش و استعلام قیمت با کارشناسان مجرب مجموعه تماس حاصل فرمایید.

تنوع محصولات با بالاترین کیفیت و بهترین قیمت در هلدینگ KTG برای کسب اطلاعات بیشتر با مشاوران ما تماس بگیرید. 

لطفا جهت اخذ مشاوره و استعلام قیمت با کارشناسان شرکت کیمیا طب گستر تماس حاصل بفرمایید.

شماره های تماس عبارتند از:

021-44276021

021-44276022

021-44276023

021-44276024

021-44276025

0912-1223103 (مشاور فنی)

0902-4809888 (بخش بازرگانی – پیام در واتساپ)