توضیحات

ویولت رد بایل آگار

ویولت رد بایل آگار, محیط کشتی انتخابی است که برای شمارش باکتری های کولی آئروژن در آب ،

محصولات لبنی و مواد غذایی به‌کار می‌رود که از فرمول اصلی محیط کشت مکانکی آگار مشتق شده است.

ویولت رد بایل آگار  VRBA چیست؟ 

محیط کشت ویولت رد بایل آگار (VRB) برای شمارش باکتریهای گروه کولی آئروژنز از فرمول اصلی MacConkey مشتق شده است.

این محیط کشت از عناصر بازدارنده انتخابی بنفشه و نمکهای صفراوی و سیستم نشانگر لاکتوز و قرمز خنثی متکی است.

بنابراین رشد بسیاری از ارگانیسم های ناخواسته سرکوب می شود ،

در حالی که شناسایی آزمایشی باکتری های جستجو شده می تواند انجام شود.

ارگانیسم هایی که به سرعت به لاکتوز حمله می کنند کلنی های بنفش احاطه شده توسط هاله های بنفش تولید می کنند.

غیر تخمیر کننده ها یا تخمیر کننده های دیررس لاکتوز کلنی های کم رنگ با مناطق سبز ایجاد می کنند.

برخی دیگر از باکتریهای گرم منفی مرتبط ممکن است رشد کنند اما با روش همپوشانی سرکوب می شوند.

همچنین می توان با جوجه کشی تحت شرایط بی هوازی و در دمای بالا انتخاب را افزایش داد.

محیط کشت VRB از پپتون ، عصاره مخمر ، کلرید سدیم ، لاکتوز ، نمکهای صفراوی ، بنفشه کریستال ،

قرمز خنثی ، آغار و آب مقطر یا دیونیزه تشکیل شده است.

البته نتایج حاصل از آزمایشاتی که ممکن است روی آب برای شناسایی ارگانیسم های کولی آئروژن به عنوان

شاخص های احتمالی آلودگی مدفوع اعمال شود ، هنگامی که روی غذا های خام اعمال می‌شود ، اهمیت کمتری دارد.

همچنین برای تشخیص و شمارش انتروباکتریاسه در محصولات غذایی به‌کار می رود.

بررسی و شناسایی محتوای کل انتروباکتریاسه ها در مواد غذایی توسط موسل و همکاران مورد بررسی قرار گرفت که

افزودن گلوکز به محیط موجود برای تشخیص کلی فرم ها عملکرد را بهبود می‌بخشد.

کلی فرم :

کلی فرم به کلیه باکتریهای اطلاق می شود که  میله ای شکل غیر هوازی ، گرم منفی ، غیر اسپور می باشند و

لاکتوز را با تشکیل گاز و اسید ظرف 48 ساعت در 35 درجه سانتیگراد تخمیر می کنند.

روش های شناسایی ، شمارش و شناسایی مفروض کلی فرم ها در آزمایش مواد غذایی و لبنیات استفاده می شود.

برای این منظور یکی از روش های انجام آزمایش پیش فرض برای کلی فرم ، از بنفش بنفش آگار (VRBA) می باشد.

در واقع می توان گفت محیط کشت Violet Red Bile Agar یک ماده انتخابی است که برای شناسایی و

برشماری میکروارگانیسم های کلی فرم تخمیر لاکتوز استفاده می شود.

محیط کشت ویولت رد بایل آگار محیط بسیار مناسبی برای رشد باکتری های گرم منفی مقاوم به نمک های صفراوی است.

البته توجه شود که محیط کشت ویولت رد بایل‌ آگار محیط اختصاصی برای انتروباکتریاسه ها به شمار نمی‌رود.

انواع دیگری از میکروارگانیسم ها ممکن است در این محیط رشد کنند اما

باکتری های گرم مثبت به علت وجود نمک های صفراوی و کریستال ویوله امکان رشد در این محیط را ندارند.

از این محیط کشت برای آزمایشات انگشت نگاری نیز استفاده می‌کنیم.

اساس کار :

اساس کار محیط کشت بر اساس تخمیر قند لاکتوز است.

به‌گونه ای که باکتری های تخمیر کننده لاکتوز با تخمیر لاکتوز و تولید اسید و گاز باعث تغییر رنگ محیط کشت می شود و

همچنین باعث رسوب نمک های صفراوی را شاهد هستیم.

دستورالعمل آماده سازی :

38/5 گرم از پودر محیط کشت را در 1000 میلی لیتر آب مقطر از پیش آماده شده

در ارلن مایر ترکیب کرده و اجازه دهید به طور کامل حل شود.

سپس محلول را در بن ماری یا روی چراغ الکلی به مدت یک الی دو دقیقه حرارت داده.

( البته به خاطر داشته باشید که از حرارت دادن بیش از حد محلول جلوگیری کنید. )

سپس به مدت 15 دقیقه در اتوکلاو 121 درجه قرار داده و خارج کنید.

اجازه دهید در دمای 40 الی 50 درجه خنک شود.

اکنون محیط کشت را در ظرف استریل مورد نظرتون ریخته و آماده‌ی استفاده می‌باشد.

محیط کشت حاوی ترکیبات زیر است ( بر حسب گرم در لیتر ):

پپتون : 7/00

عصاره مخمر : 3/00

نمک صفراوی : 1/500

لاکتوز : 10/00

سدیم کلرید :5/00

نوترال رد: 0/03

کریستال ویوله : 0/002

آگار :15/00

پپتون به عنوان منبع تامین کننده‌ی کربن به‌کار می‌رود.

عصاره مخمر تامین کننده‌ی ویتامین های گروه ب است.

آگار ایجاد کننده‌ی حالت جامد در محیط است.

کریستال ویوله و نمک های صفراوی عامل بازدارنده برای رشد باکتری های گرم مثبت هستند.

نوترال رد نیز به عنوان شناساگر به کار می‌رود.

لاکتوز نیز به عنوان منبع تامین کننده‌ انرژی در محیط عمل می‌کند.

سدیم کلرید الکترولیت های ضروری برای انتقال و تعادل اسمزی را تامین می‌کند.

مشخصات ظاهری :

محیط کشت غیر آماده : پودری شکل و به رنگ صورتی _ آلبالویی دیده می‌شود.

محیط کشت آماده : مایع و به رنگ صورتی شفاف دیده می‌شود.

کنترل کیفیت :

انتروکوکوس فکالیس atcc19433 : رشد نمی کند.

اشرشیای کلای  atcc25922  : رشد می‌کند و کلنی به رنگ بنفش ایجاد می‌کند.

پسودوموناس آئروژینوزا   atcc27853 : رشد می کند و کلنی به رنگ سبز ایجاد می‌کند.

به طور کلی ایجاد کلنی قرمز رنگ در محیط نشان دهنده‌ی رشد باکتری های گرم منفی است.

همچنین از بازدید سایت شارلو غافل نمانید!!!!

جهت اخذ مشاوره و خرید تجهیزات آزمایشگاهی با کارشناسان ما در هلدینگ KTG تماس حاصل بفرمایید.

در صورتی که قصد خرید محیط کشت VRB AGAR را دارید می توانید با شماره های مندرج در وب سایت با ما در تماس باشید.

تا همکاران ما به صورت کامل شما را در جریان خرید این نوع از محیط کشت قرار بدهند .

لازم به ذکر می باشد در ساعات غیر اداری و روز های تعطیل نیز می توانید