ویولت رد بایل دکستروز

توضیحات

ویولت رد بایل دکستروز

ویولت رد بایل دکستروز محیط کشتی جامد و انتخابی است. محیط کشت VRBD (Violet Red Bile Dextrose) agar برای تشخیص و شمارش انتروباکتریاسه های موجود در غذای انسان و حیوان و باکتریهای گرم منفی موجود در محصولات دارویی است.

این محیط کشت برای آزمایشات میکروبی محصولات غیر استریل مورد استفاده قرار می‌گیرد. این محیط کشت همچنین با نام‌های Violet Red Bile Glucose (VRBG) agar یا Crystal Violet Neutral red Bile Glucose (Dextrose) agar نیز شناخته می‌شود.

هدف از این مقاله توضیح مختصر و مفیدی درمورد محیط کشت ویولت رد بایل دکستروز آگار و بررسی جنبه های مختلف آن است. پس تا انتهای مقاله همراه ما باشید.

محیط کشت ویولت رد بایل دکستروز آگار چیست؟

محیطی که برای شناسایی و جداسازی گونه های انتروباکتریاسه های موجود در مواد غذایی و همچنین خوراک دام و نمونه های محیطی بکار می‌رود. علت انتخابی بودن محیط، وجود نمک های صفراوی و بنفش کریستالی است که مانع از رشد باکتری های گرم مثبت می‌شود.

خوب است بدانیم ویولت رد بایل دکستروز آگار محیطی مناسب برای رشد باکتری های گرم منفی مقاوم به نمک های صفراوی است. ماسل و همکارانش با اضافه کردن دکستروز (گلوکز) به محیط کشت ویولت رد بایل آگار، باعث افزایش بهره‌وری محیط کشت شده اند.

ویژگی محیط کشت ویولت رد بایل آگار(VRBD) :

• pH خنثی
• محیط کشت انتخابی برای باکتری های گرم منفی مقاوم به صفرا
• حاوی کریستال ویوله و نمک های صفراوی به عنوان عامل مهار کننده

کاربرد محیط کشت ویولت رد بایل آگار(VRBD) :

• شناسایی و شمارش باکتری های انتروباکتریاسه
• برای شمارش باکتری های انتروباکتریاسه در محصولات دارویی

اساس کار این محیط کشت چیست؟

انتروباکتریاسه ها به سرعت گلوکز را تخمیر می‌کنند و باعث تولید اسید و گاز می‌شوند و بنابراین ph محیط را کاهش می‌دهد. به دلیل وجود نشانگر قرمز خنثی و بنفش کریستالی در محیط،کلنی هایی به رنگ بنفش-صورتی ایجاد می‎‌شود که این کلنی ها توسط هاله های بنفش رنگ احاطه شده اند.

همانطور که قبلا بارها و بارها گفته‌ایم محیط کشت اختصاصی برای انتروباکتریاسه ها، محیط کشت مکانکی آگار و یا محیط ائوزین‌متیلن‌بلو است.

انتروباکتریاسه ها چگونه باکتری هایی هستند؟

باسیل های گرم منفی بی‌هوازی اختیاری هستند که همگی آنها توانایی تخمیر گلوکز را دارند و جزو پراهمیت ترین باسیل های گرم منفی در پزشکی هستند. انتروباکتریاسه ها در آب، خاک و سبزیجات و منابع حیوانی وجود دارند و می‌توانند در دستگاه گوارش انسان و جانوران کلونیزه شوند. ( در مسمومیت های غذایی نقش دارند.)

یکی از خصوصیاتی که در طبقه بندی انتروباکتریاسه ها اهمیت دارند مقاومت آنها به نمک های صفراوی است. به این ترتیب با اضافه کردن املاح صفراوی به محیط رشد، این دسته از باکتری ها را از سایر باکتری های فلورنرمال جدا می‌کنیم. مثل جداسازی شیگلا و سالمونلا از باکتری های فلور نرمال.

همچنین یکی دیگر از خصوصیاتی که در طبقه بندی انتروباکتریاسه ها اهمیت دارند مصرف لاکتوز می‌باشد. براساس این ویژگی دو گروه می‌شوند: گروهی که لاکتوز را تخمیر می‌کنند و گروه دیگر آنهایی که از لاکتوز را تخمیر نمی‌کنند. آنهایی که لاکتوز را تخمیر می‌کنند، کلونی  هایی به رنگ بنفش-صورتی ایجاد می‌کنند. (تولید اسید و متعاقب آن تغییر رنگ محیط رشد)

مشخصات ظاهری محیط کشت:

محیط آماده: به صورت مایع ارغوانی رنگ و کدر است.

محیط غیر آماده: به صورت پودر صورتی رنگ است.

محیط کشت ویولت رد بایل دکستروز آگار از چه موادی تشکیل شده است؟

عصاره‌‌ی مخمر: 3

نمک صفراوی: 1/5

سدیم کلراید: 5

نوترال رد: 0/03

کریستال ویوله:0/002

گلوکز: 10

آگار: 12

تمامی واحد ها بر اساس میلی گرم- لیتر است.

Ph نهایی محیط کشت در دمای 25 درجه 7/4  ± 0/2 است.

گلوکز منبع اصلی تامین کننده‌ی قند است، آگار ایجاد کننده‌ی حالت جامد در محیط است.

نوترال رد بعنوان شناساگر عمل می‌کند.

سدیم کلراید نیز باعث ایجاد تعادل اسمزی در محیط کشت می‌شود.

عصاره‌ی مخمرتامین کننده‌ی ویتامین های مورد نیاز در محیط است.

نمک های صفراوی و کریستال ویوله عامل اصلی انتخابی بودن محیط کشت است که

اجازه‌ی رشد باکتری های گرم مثبت را نمی‌دهد.

کنترل کیفیت:

اشرشیای کلای ATCC25922:رشد: خوب/ رنگ کلنی: قرمز- ارغوانی

سالمونلا تیفی‌موریومATCC14028  : رشد: خوب/ رنگ کلنی: قرمز- ارغوانی

انتروکوکوس فکالیس ATCC29212 :عدم رشد در محیط ویولت رد بایل دکستروز آگار

تفاوت محیط کشت ویولت رد بایل دکستروز آگار با محیط کشت ویولت رد بایل آگار در چیست؟

قند موجود در محیط ویولت رد بایل دکستروز آگار از نوع گلوکز (دکستروز) است

ولی  در محیط ویولت رد بایل آگار از نوع لاکتوز است.

دستورالعمل استفاده از این محیط کشت :

38/5 گرم از پودر محیط کشت را با ترازو اندازه‌گیری کرده و در 1000 میلی‌لیتر آب مقطر از پیش ریخته شده در

ارلن مایر سوسپانسون شود و خوب بهم بزنید تا کاملا در آب حل شود.

سپس به مدت یک الی دو دقیقه روی بن ماری یا چراغ الکلی حرارت دهید و مرتبا هم بزنید تا کاملا حل شود.

فقط توجه کنید که از حرارت دادن بیش از حد محلول خودداری کنید وگرنه ممکن است محلول بجوشد.

سپس محلول را به مدت 15 دقیقه در اتوکلاو 121 درجه اتوکلاو کنید و سپس اجازه دهید در دمای 30 الی 40 درجه خنک شود و

به ظرف استریل مورد نظر منتقل کرده.

مدت نگهداری برای این محیط کشت دو هفته است ولی می‌توان با درنظر گرفتن تدابیری آن را افزایش داد.

 

جهت مشاهده انواع فیمت محیط کشت ها لطفا روی کلمه لیست قیمت کلیک فرمایید.

همچنین از بازدید سایت شارلو غافل نمانید!!!!

جهت اخذ مشاوره و خرید تجهیزات آزمایشگاهی با کارشناسان ما در هلدینگ KTG تماس حاصل بفرمایید.