جهت مشاوره با شماره 09121223103 تماس حاصل فرمائید

محیط کشت مکانکی آگار

  • 20کامنت
  • 2021/05/09
  • شیرین
  • 128

محیط کشت مکانکی آگار

محیط کشت مکانکی آگار , محیطی انتخابی و افتراقی برای جداسازی باکتری های گرم منفی روده ای است .

شاخص پایه آن رنگ قرمز است در ph های زیر 6/8 به رنگ قرمز و در ph های بالای 6/8 بی رنگ است.

محیط کشت مکانکی آگار به دلیل داشتن املاح صفراوی و کریستال ویوله مانع رشد باکتری های گرم مثبت شده

و عامل افتراق بر اساس تخمیر لاکتوز صورت میگیرد.

باکتری های تخمیر کننده لاکتوز مانند اشرشیاکلی با مصرف لاکتوز مقداری اسید تولید کرده که

منجر به کاهش ph به زیر 6/8 شده رنگ محیط کشت تغییر کرده و به رنگ ارغوانی تبدیل میشود.

باکتری های لاکتوز منفی مانند شیگلا و سالمونلا به دلیل عدم مصرف لاکتوز رنگ محیط کشت بی رنگ و شفاف است.

کاربرد میزاناجزا سازنده
منبع انرژی و کربن 20gr پپتون
مهار رشد باکتری های گرم مثبت 1/5gr نمک های صفراوی
منبع انرژی و کربن 10gr لاکتوز
منبع سدیم و کلر 5gr کلریدسدیم
شاخص ph0/03gr رنگ قرمز
مهار رشد باکتری های گرم مثبت 0/001gr کریستال ویوله

محیط کشت مکانکی آگار توسط آلفردو تئودور مکانکی ( باکتری شناس انگلیسی )  در قرن بیستم ( 1881 ) ساخته شد.

محیط کشت مکانکی آگار محیط کشتی انتخابی ، افتراقی  و جامد است که برای تشخیص ،

جداسازی و شمارش باسیل های گرم منفی روده ای ( انتروباکتریاسه ) و

باکتری های گرم منفی تخمیر کننده و غیر تخمیر کننده به کار می رود.

باکتری های موجود در روده بزرگ لاکتوز را تجزیه کرده و اسید های چرب و

گاز هایی مانند کربن دی اکسید ، هیدروژن و متان تولید می کند.

به طور کلی محیط کشت بلاد آگار محیط غیر انتخابی برای انتروباکتریاسه است ولی

از جمله محیط هایی که در تشخیص به ما کمک می کنند محیط کشت مکانکی آگار است که

تخمیر لاکتوز را مشخص می کند که باکتری در آن با جلای فلزی رشد می کند و اختصاصی است.

و کریستال ویوله و نمک صفراوی دارد.

البته توجه شود که در محیط EMB که باکتری در آن با جلای فلزی رشد می کند ، از محیط های انتخابی برای انتروباکتریاسه است.

جهت تفکیک میکروارگانیسم های روده ای از ترکیب لاکتوز و معرف نچرال رد استفاده می شود.

اگر یک باسیل گرم منفی روی بلاد آگار رشد کند ، اما روی محیط کشت مکانکی آگار رشد نکند یا

به طور ضعیف رشد کند ، مشکوک به گروه وابسته به غیر تخمیر کننده ها است.

غلظت نمک های صفراوی در محیط کشت مکانکی آگار در مقایسه با دیگر نمک های صفراوی

برای مهار باکتری های گرم منفی روده ای ( انتروباکتریاسه ) که تحمل نمک های صفراوی را ندارند استفاده می شود ,بیشتر است.

باید بدانیم علت عملکرد انتخابی بودن محیط کشت مکانکی آگار وجود نمک های صفراوی است.

هم چنین محیط کشت مکانکی آگار اولیه ترین ماده انتخابی و افتراقی برای پرورش ارگانیسم های کلی فرم است که

برای شناسایی ، جداسازی و تشخیص باسیل های گرم منفی روده ای ( انتروباکتریاسه ) به کار می رود.

البته توجه شود که برای جداسازی انواع مایکوباکتریوم از مکانکی آگار بدون کریستال ویوله استفاده می شود.

محیط کشت مکانکی آگار یکی از مهم ترین و کاربردی ترین محیط کشت ها در میکروبیولوژی است که

برای تمایز باسیل های گرم منفی روده ای به خصوص اشرشیای کلای کاربرد دارد.

کاربرد محیط مک کانکی آگار :

1- جداسازی باکتری های گرم منفی روده ای

2- تمایز باکتری های گرم منفی لاکتوز مثبت و لاکتوز منفی

3- جداسازی پاتوژن های کلی فرم روده ای در آب , لبنیات و نمونه های بیولوژیکی.

تهیه نمونه :

برای تهیه نمونه می توانیم از نمونه های مدفوع ، ادرار ، آب و فاضلاب و مواد غذایی استفاده کرد.

محدودیت های محیط کشت مک کانکی آگار 

1- عدم رشد یا رشد ضعیف برخی از سویه های میکروبی

2- قرار گرفتن پلیت های حاوی محیط مک کانگی آگار در انکوباتور با افزایش دی اکسید کربن

منجر به کاهش رشد برخی از سویه های باکتری های گرم منفی میشود .

3- رشد برخی از گونه های پروتیوس در محیط کشت.

اساس کار محیط کشت مکانکی آگار :

اساس تشخیص و جداسازی  در محیط کشت مکانکی آگار واکنش باکتری ها به لاکتوز موجود در محیط کشت است.

به گونه ای که باسیل های گرم منفی تخمیر کننده لاکتوز( لاکتوز مثبت ) مانند اشرشیای کلای و

کلبسیا به صورت کلنی های صورتی تا قرمز دیده می شود .( به دلیل تولید اسید و کاهش ph  به6/8 )  و

باسیل های غیر تخمیر کننده لاکتوز ( لاکتوز منفی ) مانند سالمونلا ، شیگلا ، پروتئوس که کلنی شفاف یا بی رنگ ایجاد می کنند.

باسیل های گرم منفی غیر تخمیر کننده به جای استفاده از لاکتوز از پپتون موجود در محیط کشت استفاده می کنند.

البته توجه شود که  می توان  لاکتوز را در محیط های دیگر با قند های دیگر جایگزین کرد و

از قند های جایگزین می توان برای آزمایش توانایی باکتری گرم منفی در تخمیر قند های جایگزین استفاده کرد.

برای مثال سوربیتول می تواند به عنوان یک قند جایگزین در مکانکی آگار برای کمک به جداسازی و تمایز سروتیپ های ای کلای استفاده گردد.

محیط کشت مکانکی آگار حاوی ترکیبات زیر است  ( برحسب گرم بر لیتر ) :

آگار 15

سدیم کلرید 5

لاکتوز 10

نمک های صفراوی 1/5

کریستال ویوله 0/100

معرف نچرال رد 0/02

پپنون کازئین و گوشت 1/5

Ph نهایی در دمای 25 درجه 7/1 ± 0/2 است.

به طور کلی نمک های صفراوی برای مهار باکتری های گرم منفی روده ای ( انتروباکتریاسه ) که

تحمل نمک های صفراوی را ندارند استفاده می شود،  کریستال ویوله برای مهار باکتری گرم مثبت استفاده می شود.

( کریستال ویوله رشد میکروارگانیسم های گرم مثبت ، به ویژه انتروکوک ها و استافیلوکوک ها را مهار می کند. )

اگر ارگانیسم قند لاکتوز را استفاده کند محیط اسیدی شده و در نتیجه نمک صفراوی جذب محیط قلیایی می شود.

پس از رسوب نمک های صفراوی ،  جذب معرف نوترال رد شده و بنابراین کلنی ها رنگ می شوند. ( صورتی تا قرمز)

پپتون کازئین  و گوشت منبع تامین کننده ی کربن ، ویتامین ها و سایر مواد معدنی می باشد.

سدیم  کلرید تعادل اسمزی را حفظ می کند  ، معرف نوترال رد نشانگر ph  است و آگار حالت جامد به محیط کشت می دهد.

پپتون ها از هضم آنزیماتیک عضله ی قلب ، کازئین ، فیبرین  یا آرد سویا توسط پپسین یا تریپسین تهیه می شود.

پپتون حاوی پروتئین ، پپتید و اسید های آمینه مختلف است.

هم چنین این ماده حاوی نمک های معدنی (پتاسیم ، منیزیوم ، فسفات) و فاکتور های رشد ( اسید نیکوتنیک و فلاوین ) می باشد.

پپتون باید به خوبی باعث رشد ارگانیسم های مشکل پسند شود.

آماده سازی محیط کشت مکانکی آگار :

51/5 گرم از پودر محیط کشت را با 1000 میلی لیتر آب مقطر سوسپانسیون شود. ( مرتب هم بزنید تا پودر کاملا حل شود.)

و حجم محلول را به میزان مشخص شده در کاتالوگ برسانید و سپس محلول را در حدود یک الی دو دقیقه در بن ماری بجوشانید.

( از جوشاندن بیش ار حد خودداری کنید ) و سپس در دمای 121 درجه و به مدت 15 دقیقه اتوکلاو کنید و

اجازه دهید در دمای 40 الی 50 درجه خنک شود و سپس در درون ظرف استریل ریخته و آماده ی مصرف می باشد.

کنترل کیفیت :

اشرشیای کلای 29922 : رشد کلنی ها به رنگ صورت صورتی

پروتئوس میرابیلیس 12453 : رشد کلنی ها بی رنگ

انتروکوکوس فکالیس 29212 : رشد به طور جزئی مهار می شود.

برای بدست آوردن اطلاعات بیشتر در مورد قیمت محیط کشت  به سایت شرکت کیمیا طب گستر مراجعه فرمایید

و لیست قیمت quelab  را مطالعه بفرمایید .

اگر به دنبال بهترین کیفیت محیط کشت‌ها‌ی میکروبی و سلولی با نازل‌ترین قیمت‌ها از معتبرترین کمپانی‌ها هستید

با کارشناسان شرکت کیمیا طب گستر تماس حاصل فرمایید.

شماره‌های تماس عبارتند از:

44276021 – 021

44276022 – 021

44276023 – 021

44276024 – 021

44276025 – 021

0912-1223103

0902-4809888 (پیام در واتساپ)

هلدینگ KTG ارایه دهنده انواع محیط های کشت میکروبی و سلولی است .

برای اطلاعات بیشتر در مورد محیط کشت میکروبی فوق از سایت شرکت کیمیا طب گستر دیدن فرمایید

و به لیست محصولات شرکت شارلو  نیز مراجعه نمایید.

 

برای امتیاز به این نوشته کلیک کنید!
[کل: 1 میانگین: 5]