توضیحات

محیط برلیانت گرین آگار

محیط برلیانت گرین آگار ( brilliant _ green phenol_ red lactose sucrose agar) یا همان محیط کشت bpls ,

محیط کشتی انتخابی ، افتراقی و جامد است که برای شناسایی و جداسازی گونه های سالمونلا

(به غیر از سالمونلا تیفی و شیگلا ) از نمونه های مواد غذایی ، ادرار ، مدفوع به کار می رود.

محیط BPLS  همان محیط BGA ( برلیانت گرین آگار )  است و BPLS  اسم کامل محیط کشت است.

اولین بار این محیط کشت توسط کریستنسن و  همکارانش در سال 1925

برای جداسازی سالمونلا از نمونه های مدفوع ، مواد غذایی و لبنیات به کار گرفته شد.

بعد ها کافمن در سال 1935 این فرمول را اصلاح و به شکل امروزی درآورد.

البته اضافه کردن سولفانامیدها به بهبود جداسازی سالمونلا کمک می کند به طوری که

با اضافه نمودن یک گرم سولفا پیریمیدین به یک لیتر از این محیط کشت احتمال جداسازی سالمونلا بیشتر می گردد.

هم چنین با اضافه کردن دی اکسیلات به محیط کشت از رشد پروتئوس ها نیز جلوگیری می شود.

باکتری های گرم مثبت به خوبی در محیط کشت bpls  رشد می کنند و باکتری های گرم منفی به شدت مهار می شوند.

توجه شود برای شناسایی سالمونلا و شیگلا از محیط های مختلفی برای کشت می توان استفاده نمود از جمله :

محیط های ساده مانند بلاد آگار و محیط های افتراقی مانند محیط های مکانکی که هم افتراقی است و هم انتخابی.

محیط انتخابی :

این محیط حاوی نمک های صفراوی و کریستال ویوله است که از رشد باکتری های گرم منفی جلوگیری می کند.

محیط افتراقی :

این محیط حاوی قند لاکتوز است و باکتری هایی که از این قند استفاده می کنند

کلونی های صورتی رنگ  ( به علت تخمیر قند لاکتوز ) ایجاد می کنند.

اگر سالمونلا و شیگلا داشته باشیم ، نمی توانند از قند لاکتوز استفاده کنند و

کلونی بی رنگ ایجاد می کنند و محیط زرد ررنگ باقی می ماند.

البته محیط های دیگری نیز در آزمایشگاه وجود دارد که برای شناسایی سریع تر سالمونلا و شیگلا استفاده می شوند

مانند هکتون انتریک آگار ، سالمونلا _ شیلا و EMB  آگار

گونه های سالمونلا قابلیت تخمیر قند های لاکتوز و ساکارز را ندارند پس بنابراین

در هر دو محیط کشت   BPLS آگار و محیط کشت BGA( برلیانت گرین آگار )  به صورت لاکتوز منفی هستند.

 

 

از این محیط کشت برای مهار باکتری های گرم مثبت و اکثر باکتری های گرم منفی استفاده می شود.

ساکارز و لاکتوز موجود در محیط که به عنوان کربوهیدرات های قابل تخمیر شناخته شده اند،

در مقایسه با محیط کشت  اوره اگار یا محیط کشت کریستنسن ، محیط کشت غنی شده با مواد مغذی و نمک های سولفاته است.

اساس کار :

اساس کار ، بر مبنای تخمیر قند لاکتوز است.

به طوری که گونه های تخمیر کننده ی لاکتوز ( لاکتوز مثبت ) با تخمیر لاکتوز تولید اسید می کنند.

در نتیجه باعث کاهش ph محیط می شود( مانند اشرشیای کلای ، پروتئوس ، استافیلوکوکوس اورئوس) .

بنابراین فنول رد که شناساگر موجود در محیط کشت است و در حالت قلیایی به رنگ قرمز تیره  دیده می شود ،

تغییر رنگ داده و به رنگ زرد در می آید.

به طور کلی در صورت تخمیر لاکتوز محیط کشت به رنگ زرد _ سبز در می آید و

درصورت عدم تخمیر لاکتوز رنگ محیط به صورت قرمز با هاله ی صورتی دیده می شود.

پس محیط کشت قرمز رنگ نشان دهنده ی لاکتوز و ساکارز منفی و

محیط کشت زرد نشان دهنده ی لاکتوز و ساکارز مثبت است .

سالمونلا باسیل گرم منفی بی هوازی اختیاری است که از طریق محصولات لبنی ، مرغ و تخم مرغ منتقل می شوند.

مهم ترین منبع انتقال عفونت به انسان از طریق مرغ و تخم مرغ و لبنیات و غذای آلوده است.

سالمونلا به سه دسته کلراسوئیس ، انتری تیدیس و تیفی تبدیل می شود که

سالمونلا تیفی و پاراتیفی فقط در انسان بیماری زایی می کنند.

شیگلا هم باسیل گرم منفی است که قرابت زیادی به اشرشیای کلای دارد و

عامل بیماری دیسانتری باسیلی خونی یا شیگلوز است. شیگلا فاقد حرکت است.

همچنین نسبت به سایر باسیل های روده ای ، مقاومت کمتری به عوامل شیمیایی و فیزیکی دارد.

همگی به جز سالمونلا تیفی و اینتری تیدیس در هنگام تخمیر گلوکز گاز تولید می کنند.

همگی H2S  تولید می کنند به جز سالمونلا پاراتیفی A  و کلرا سوئیس.

محیط کشت BPLS  حاوی ترکیبات زیر است ( برحسب گرم در لیتر ) :

پپتون 10/0

عصاره جو 3/0

لاکتوز 10/0

ساکارز 10/0

سدیم کلراید 5/0

فنول رد 0/08

برلیانت آگار 0/0125

آگار 13/0

PH  نهایی در دمای 25 درجه 6/9 ± 0/2 است.

ساکارز و لاکتوز به عنوان منبع انرژی  ،

عصاره مخمر تامین کننده ویتامین های گروه B ،

فنول رد به عنوان شناساگر ،

سدیم کلراید نیز به عنوان تامین کننده ی حالت اسمزی ،

پپتون به عنوان منبع تامین کننده ی نیتروژن و کربن و آمینو اسید به کار می رود.

همچنین آگار نیز به عنوان ایجاد کننده ی حالت جامد است.

دستورالعمل :

57 گرم از پودر محیط کشت را در 1000 میلی لیتر آب مقطر  از قبل آماده شده

در ارلن مایر یا بطری سوسپانسیون کنید. ( کاملا پودر را در آب حل کنید )

سپس در بن ماری حدود 1 الی 2 دقیقه اجازه دهید که حرارت ببیند.

( از حرارت دادن بیش از حد و جوشیده شدن محلول خودداری شود )

سپس به مدت 15 دقیقه در اتوکلا 121 درجه قرار داده تا محلول استریل شود.

سپس اجازه دهید در دمای 40 الی 50 درجه خنک شود و در ظرف مورد نظر ریخته و آماده ی استفاده می باشد.

کنترل کیفیت :

سالمونلا تیفی موریوم ATCC14028  : رنگ محیط : قرمز  ( لاکتوز منفی ) ، رنگ کلنی : صورتی

سالمونلا کلراسوئیس ATCC13312  : رنگ محیط : قرمز ( لاکتوز منفی ) ، رنگ کلنی : صورتی

باسیلوس سوبتیلی  ATCC6633 : رنگ محیط : زرد ( لاکتوز مثبت ) ، رنگ کلنی : زرد

استافیلوکوکوس اورئوس ACTT25923  : رنگ محیط : زرد  ( لاکتوز مثبت ) ، رنگ کلنی : زرد

پروتئوس ولگاریس ATCC13315  : رنگ محیط : زرد ( لاکتوز مثبت ) ، رنگ کلنی : زرد

 

منبع : کمپانی شارلو ارایه دهنده انواع محیط کشت های میکروبی است.

برای اطلاع از  سایر محیط کشت های میکروبی  و همچنین قیمت محیط کشتها,

لطفا مطلب محیط کشت کیولب را مطالعه نمایید.

برای بدست آوردن اطلاعات بیشتر در مورد قیمت محیط کشت  به سایت شرکت کیمیا طب گستر مراجعه فرمایید

و لیست قیمت quelab  را مطالعه بفرمایید .

اگر به دنبال بهترین کیفیت محیط کشت‌ها‌ی میکروبی و سلولی با نازل‌ترین قیمت‌ها از معتبرترین کمپانی‌ها هستید

جهت اخذ مشاوره و خرید تجهیزات آزمایشگاهی با کارشناسان ما در هلدینگ KTG تماس حاصل بفرمایید.