محیط کشت EE براث
- 20کامنت
- 2021/06/29
- Admin
- 1095
محیط کشت EE براث :
محیط کشت EE براث چیست؟
همانطور که از نام این محیط کشت بر می آید برای غنی سازیEnterobacteriaceae استفاده می شودو
این تغییر در سال 1963 توسط Mossel روی محیط کشت قدیمی Brilliant Green Bile 2% Broth صورت گرفته است.
جایگزین گلوکز با لاکتوز قابل استفاده تر و مناسب تر برای شناسایی این نوع باکتری ها( شامل باکتری های تولید کننده گاز) درغذا و سایر نمونه ها است.
محیط کشت EE براث محیط کشتی مایع ،انتخابی و غنی است که
برای شناسایی انتروباکتریاسه های موجود در مواد غذایی و دارویی و
همچنین گرم منفی های تحمل کننده ی صفرا به کار می رود.
محیط کشت EE براث توسط Mossel ، Visser و Cornelissen ابداع شد تا رشد انتروباکتریاسه ها را تسهیل شود.
با اضافه کردن نمک های صفراوی (Oxil Bile و Bile salts ) از رشد میکروارگانیسم های مزاحم مثل
باکتری های گرم مثبت ( مانند استرپتوکوک ها و باسیل ها ) جلوگیری می شود و
به همین دلیل به محیط کشت خاصیت انتخابی داده است.
شمارش انتروباکتریاسه برای سلامت وضعیت بهداشتی مواد غذایی حائز اهمیت است.
از محیط کشت EE براث برای شناسایی عوامل بیماری زای انسانی به کار نمی رود.
از محیط کشت EE براث برای انجام آزمایش های MNP (میکرویولوژی آب ) استفاده می شود.
EE براث اصلاح شده ی لاکتوز موجود در محیط کشت برلیانت گرین بایل است.
انتروباکتریاسه ها یا باسیل های گرم منفی که همگی توانایی تخمیر گلوکز را دارند و بی هوازی اختیاری هستند.
اشرشیای کلای مهم ترین جنس در این خانواده می باشد که جایگاه اصلی آن دستگاه گوارش
یکی از ویژگی های مهم این خانواده مقاومت آن ها به نمک های صفراوی می باشد.
به طوری که با اضافه کردن املاح صفراوی به محیط کشت ،
این دسته از باکتری ها را از سایر باکتری های فلور نرمال جدا می کنیم برای مثال
جداسازی شیگلا و سالمونلا از باکتری های فلور نرمال.
اساس کار:
تخمیر لاکتوز تست بسیار مهم و کلیدی برای افتراق گونه های انتروباکتریاسه از یکدیگر است که
نتایج حاصل از این تست را به صورت کسر بیان می کنند.
هر لوله قندی ، یک لوله کوچک دورهام وارونه و معرف فنل رد ،
عمل تخمیر با تولید اسید و گاز و فقط اسید پایان می یابد.
کاهش PH نشانه تولید اسید است و جمع شدن حباب در لوله کوچک دورهام دلیل تولید گاز است.
اساس کار این محیط کشت بر اساس تخمیر لاکتوز است به طوری که
گونه های تخمیر کننده ی لاکتوز با تخمیر لاکتوز و تولید اسید و گاز باعث تغییر رنگ محیط و اسیدی شدن محیط می شود.
مشخصات ظاهری :
محیط آماده : مایع است و به رنگ سبز شفاف دیده می شود.
محیط غیر آماده :به صورت پودری است و رنگ زرد دیده می شود.
کنترل کیفیت :
اشرشیای کلای ATCC25922 : به خوبی رشد می کند و محیط را به رنگ بژ روشن تا سبز روشن در می آورد.
سالمونلا تیفی موریوم ATCC14028 : به خوبی رشد می کند و محیط را به رنگ زرد در می آورد.
محیط کشت EE براث حاوی ترکیبات زیر است ( گرم در لیتر ) :
اکس بایل 20
سدیم فسفات 8
دکستروز ( گلوکز ) 5
پتاسیم فسفات 2
برلیانت گرین 0/015
نمک های صفراوی 20
پپتون 10
Ph نهایی در دمای 25 درجه 7/2 ±0/2 است.
پپتون به عنوان منبع تامین کننده ی نیتروژن و آمینواسید ،
پتاسیم فسفات به عنوان ایجاد کننده ی حالت بافری محیط ،
دکستروز یا گلوکز منبع تامین انرژی برای محیط کشت است.
اکس بایل و نمک های صفراوی برای مهار میکروارگانیسم های مزاحم مانند باسیلوس ها و استرپتوکوک ها به کار می رود.
دستورالعمل استفاده:
43 گرم از پودر محیط کشت را روی ترازو وزن کرده و سپس با 1000 میلی لیتر آب مقطر از پیش آماده شده
در ارلن مایر ترکیب کرده و سپس به مدت یک الی دو دقیقه در بن ماری یا چراغ الکلی گرما ببیند.
توجه شود پودر کاملا در آب حل شود و محلول نجوشد.
سپس در دمای 121 درجه و به مدت 15 دقیقه در اتوکلاو قرار داده.
آنگاه اجازه دهید محیط در دمای 40 الی 50 درجه خنک شود.
و پس از آن درون ظرف مناسب ریخته شود و آماده ی مصرف می باشد.
توجه شود که محیط هایی که باید در لوله تهیه گردند قبل از استریلیزاسیون
به مقدار مناسب در لوله ریخته شده و سپس اتوکلاو می گردند.
همچنین محیط هایی که باید در پلیت تهیه گردند بعد از اتوکلاو
و در کنار شعله و تحت شرایط استریل در پلیت تقسیم می گردند.
3 تا 5 درصد پلیت های تهیه شده قبل از استفاده باید به مدت 48 ساعت و
در دمای 37 درجه انکوبه گردند تا استریل بودن آن ها مورد تایید قرار گیرد .
نمونه سبز رنگ : نتیجه ی منفی آزمایش است و انتروباکتریاسه در محیط وجود ندارد . نمونه زرد رنگ : نتیجه ی مثبت است و انتروباکتریاسه موجود در محیط کشت است.
-
اقدامات پیشگیرانه:
- این محصول تنها جهت استفاده آزمایشگاهی و تشخیصی است.
- این محصول برای چشمها، دستها و دستگاه تنفسی تحریک آمیز است،
- بنابراین توصیه میگردد در زمان استفاده از ماسک محافظتی و دستکش استفاده شود.
- با رعایت موارد استریلیزاسیون استاندارد آزمایشگاهی استفاده و به کار رود.
- پس از مصرف توسط Auto Clave گندزدایی شده ودفع گردد(باتوجه به دستورالعملهای اجرائی آزمایشگاه مرجع سلامت)
- شیوه نگهداری و میزان ماندگاری:
- جهت نگهداری آن نیازی به استفاده از یخچال نیست و می توان آن را در دمای اتاق و حدود C° 25 نگهداری نمود.
- این محصول نمی بایست در معرض تابش مستقیم نور قرار گیرد.
- مطابق مطالعات انجام شده در این شرکت، شرایط نگهداری این محصول در دمای اتاق میباشد و
- با توجه به فاکتور Dew Point (نقطه شبنم) توصیه میگردد که جهت جلوگیری از ایجاد بخار در داخل سطح پلیت ها
- دمای اتاق در حد C° 25 و رطوبت نسبی آن نیز در حدود 35 تا 40 درصد نگاه داشته شود.
- ماندگاری این محصول از زمان تولید و در دمای اتاق، 45 – 40 روز می باشد.
جهت مشاهده انواع فیمت محیط کشت ها لطفا روی کلمه لیست قیمت کلیک فرمایید.
همچنین از بازدید سایت شارلو غافل نمانید!!!!
برای مشاوره و اطلاعات بیشتر لطفا با کارشناسان ما تماس بگیرید.
شماره های تماس با شرکت کیمیا طب گستر:
0912-1223103
0902-4809888 ( پیام در واتساپ)
44276021 – 021
44276022 – 021
44276023 – 021
44276024 – 021
44276025 – 021
