توضیحات

محیط کشت CN آگار

محیط کشت CN آگار چیست؟  این محیط کشت برای چه میکروارگانیسم هایی استفاده می‌شود؟

سی ان آگار از چه موادی تشکیل شده است؟

در این مقاله قصد داریم علاوه بر پاسخ دادن به این سوالات به معرفی کامل این محیط کشت بپردازیم و

شما را بیشتر با این محیط کشت آشنا کنیم.

امروزه اهمیت میکروارگانیسم ها و به ویژه باکتری ها در زندگی ما قابل توجه است. از این رو تصمیم به بررسی آن گرفتیم.

سودوموناس آئروژینوزا گونه ای از جنس سودوموناس است که گستردگی زیادی در محیط های طبیعی دارد

و آن را می توان از آب، خاک و سبزی های خام جدا کرد .

سودوموناس آئروژینوزا یک باکتری بیماریزا و فرصت طلب است که در افراد بیمار،

به ویژه افرادی که سیستم ایمنی تضعیف شده دارند، ایجاد عفونت می کند و سبب تأخیر در بهبود زخم ها می شود .

این باکتری ممکن است از طریق آب استخرهای شنا که به طور کامل گندزدایی نشده اند،

به شناگران سرایت کرده و سبب ایجاد بیماریهای پوستی و عفونت گوش خارجی در آن ها شود.

سودوموناس آئروژینوزا گرم منفی، متحرک، میله ای، بدون اسپور و ناتوان در تخمیر قندها است .

دمای بهینه برای رشد آن 37 درجۀ سلسیوس است .

با این وجود در دمای 42 درجۀ سلسیوس هم می تواند رشد کند ولی در دمای کمتر از 4 درجۀ سلسیوس قادر به رشد نیست .

این باکتری اکسیدار مثبت بوده و با تجزیه استامید تولید گاز آمونیاک می کند.

بیش از 90 درصد سویه های آن، رنگدانه پیوسیانین به رنگ سبز-آبی تولید می.کنند.

از محیط کشت CN آگار برای شناسایی سودوموناس آئروژینوزا با استفاده از تکنیک های فیلتراسیون غشایی و

براساس تولید رنگدانه پیوسیانین استفاده می‌شود.

البته قابل ذکر است که رشد بر روی محیط کشت CN آگارمعمولا به سودوموناس محدود نمی‌شود و

ممکن است برخی از اعضای انتروباکتریاسه نیز در این محیط رشد کنند.

محیط کشت CN آگار  اصلاح شده‌‌ی محیط پایه‌ی Kings است که

در آن کلرید منیزیم و سولفات پتاسیم برای افزایش تولید رنگدانه وجود دارد.

جهت بهبود عملکرد محیط با اضافه کردن سفالوسپورین به میزان 50 میلی گرم و فوکسیدین به میزان 10 میلی گرم

به کارایی محیط می افزاید که با این مواد محیط جدیدی برای شناسایی سودوموناس ایجاد می‌شود.

بعد ها طی تحقیقات نشان داده شد که کاهش ستریماید باعث بهبود عملکرد محیط کشت می‌شود.

و همچنین اضافه کردن نالیدیکسات سدیم به میزان 15 میکروگرم نیز باعث افزایش عملکرد محیط می‌شود.

وجود رنگدانه هایی همچون آبی (پیوسیانین)، سبز(پیووردین) و قهوه ای(پیوروبین) ممکن است

بعنوان شواهد احتمالی برای شناسایی گونه های سودوموناس در نظر گرفته شود.

البته آزمایش های بیشتری برای تاکید هویت ارگانیسم باید صورت گیرد.

اهمیت قابل توجهی برای جدا کردن سودوموناس آئروژینوزا در آب وجود دارد به ویژه در مواردی که

قرار است از آب برای صنعت داروسازی و لوازم آرایشی استفاده شود.

مواد تشکیل دهنده‌ی ‌محیط کشت CN آگار(برحسب میلی‌گرم-لیتر):

ژلاتین پپتون 16/0

کازئین 10/0

پتاسیم سولفات 10/0

منیزیم کلراید1/4

آگار 11/0

PH نهایی در دمای 25 درجه 7/1 می‌باشد.

از ژلاتین پپتون و کازئین بعنوان منبع کربن و آمینواسید استفاده می‌کنیم.

برای سرکوب آلاینده های محیط از ستریماید استفاده می‌کنیم.

آگار بعنوان جامد کننده‌ی محیط بکار می‌رود.

از پتاسیم سولفات و منیزیم کلراید برای فعال سازی رنگدانه‌‌ی پیوسیانین استفاده می‌شود.

مشخصات ظاهری :

محیط آماده: ژل مانند و به رنگ کاهی دیده می‌شود.

محیط غیر آماده: پودری شکل است و به رنگ کاهی دیده می‌شود.

هم اکنون وقت آن رسیده است که با باکتری سودوموناس آئروژینوزا بیشتر آشنا شویم و

بدانیم این باکتری چه تاثیری بر زندگی ما دارد.

باکتری سودوموناس آئروژینوزا باسیل گرم منفی هوازی است که به خیلی از آنتی بیوتیک ها مقاوم است و

می‌تواند عفونت های بیمارستانی ایجاد کند. (شایع ترین عامل عفونت ریوی بیمارستانی سودوموناس است)

سودوموناس آئروژینوزا عامل بیماریزای فرصت طلب برای انسان است که قادر است در آب با

غلظت کم مواد مغذی رشد کند و به همین دلیل است که آب های چشمه باید در زمان تجاری سازی عاری از هر گونه سودوموناس شود.

البته این میکروارگانیسم در آب استخر نیز یافت میشود.

سودوموناس بر روی محیط های مختلفی مانند مکانکی آگار رشد می‌کند  ولی یکی از بهترین آنها محیط کشت بلاد آگار است.

یکی از ویژگی های مهم این باکتری ایجاد پیگمان های رنگی است که در عفونت ها هم می‌تواند به ما کمک کند.

از بیماریزایی مهم سودوموناس می‌توان به عفونت های تنفسی، پوستی، ادراری و چشم اشاره کرد.

بعنوان آخرین مطلب خالی از لطف نیست که درمورد چگونگی تهیه‌ی محیط کشت CN آگار بدانیم.

محیط های کشت نقش اساسی را در آزمایشگاه های میکروب شناسی ایفا می‌کنند.

بطور گسترده ای جهت جداسازی، تعیین هویت و آنتی بیوگرام میکروارگانیسم های بیماریزا بکار می‌روند.

دستورالعمل تهیه محیط:

24/2  گرم از پودر محیط کشت CN آگار را در 500 میلی لیتر آب مقطر از پیش ریخته شده

در ارلن مایر ترکیب کرده و به خوبی هم بزنید تا پودر کاملا در آب حل شود.

سپس به محلول مورد نظر 5 میلی لیتر گلیسرول اضافه می‌کنیم و سپس محلول را

به مدت یک الی دو دقیقه حرارت می‌دهیم. البته توجه شودکه از حرارت دادن بیش از حد خودداری کنید.

حال محلول را به مدت 15 دقیقه در اتوکلاو 121 درجه قرار دهید و سپس اجازه دهید در دمای 40 الی 50 درجه محلول خنک شود.

حال می‌توانیم محلول را در داخل ظروف پتری دیش بریزیم و آماده‌ی مصرف است.

 

جهت مشاهده انواع فیمت محیط کشت  لطفا روی کلمه لیست قیمت کلیک فرمایید.

همچنین از بازدید سایت شارلو غافل نمانید!!!!

جهت اخذ مشاوره و خرید تجهیزات آزمایشگاهی با کارشناسان ما در هلدینگ KTG تماس حاصل بفرمایید.