توضیحات
محیط کشت تیوگلیکولات براث
محیط کشت تیوگلیکولات براث چیست و چه کاربردی در آزمایشگاه دارد؟
تیوگلیکولات با محیط کشت تیوگلیکولات براث چه تفاوت هایی دارد؟
از محیط کشت تیوگلیکولات براث برای چه باکتری هایی استفاده میشود؟
راستی شما از تیوگلیکولات براث چه میدانید؟
محیط کشت تیوگلیکولات براث یک محیط دیفرانسیل چند منظوره ، غنی شده و مورد استفاده در درجه اول
برای تعیین نیاز اکسیژن میکروارگانیسم ها می باشد .
در ادامه توضیح این محیط کشت بهتر است بدانید که به عنوان یک آبگوشت غنی سازی است که
بیشتر در باکتری شناسی تشخیصی مورد استفاده قرار میگیرد .
اما به طور کلی کاربرد محیط کشت Thioglycollate Broth این است که
از رشد میکروارگانیسم های بی هوازی ، هوازی ، میکروآیروفیل و سریع حمایت می کند.
من و همکارانم تصمیم داریم در این مقاله علاوه بر پاسخ دادن به سوالات بالا و دیگر سوالات احتمالی شکل گرفته در ذهنتان،
بصورت مختصر و مفید به شرح محیط کشت تیوگلیکولات براث بپردازیم. پس ما را تا انتها همراهی کنید.
تیوگلیکولات یا اسید تیوگلیکولات اسید سنتز شده از منوکلرواستیک است که در صنعت شیمی و زیست شناسی بسیار کاربرد دارد.
این ماده درصورت واکنش با کلسیم باعث تولید نمک گلیکولات کلسیم میشود که
یکی از اصلی ترین مواد برای فرموله کردن و ساختن کرم های موبر است.
پس تا اینجا فهمیدیم که بین تیوگلیکولات و محیط کشت تیوگلیکولات تفاوت های بسیاری وجود دارد.
ما اینجا بیشتر قصد داریم درمورد محیط کشت تیوگلیکولات براث صحبت کنیم و با جنبه های مختلف آن آشنا شویم.
محیط کشت تیوگلیکولات براث در سال1940 توسط Brewerبرای تعیین نیاز اکسیژن میکروارگانیسم ها فرموله شد.
تیگوکلیکولات براث یک محیط دیفرانسیل چند منظوره و غنی شده است که بیشتر در باکتری شناسی بکار میرود.
در ادامه توضیح این محیط کشت بهتر است بدانیم که بصورت کلی تیگلیکولات براث از رشد میکروارگانیسم های هوازی،
میکروآئروفیل و بیهوازی حمایت میکند.
از محیط کشت تیوگلیکولات براث برای یافتن مشخصات رشد باکتری های مختلف براساس نیاز اکسیژن استفاده میشود.
از این محیط برای آزمایش های غیرفعال کردن آنتیبیوتیک ها و همچنین استریل سازی مواد بیولوژیک و مواد غذایی نیز بطور محدود بکار میرود.
در آزمایشگاه های باکتری شناسی درصورت مشکوک شدن به عفونت بیهوازی از
محیط کشت تیوگلیکولات براث برای جداسازی باکتری از خون استفاده میکنند.
از جمله موارد لازم برای رشد باکتری ها نیاز و یا عدم نیاز آنها به اکسیژن است که میتواند در رشد آنها تاثیر بسزایی داشته باشد.
باکتری های هوازی و بیهوازی را میتوان با رشد آنها در لوله های آزمایش تیوگلیکولات براث شناسایی کرد به این صورت که:
باکتری های هوازی نیاز شدیدی به اکسیژن دارند پس در بالای لوله که غلظت اکسیژن در آن بیشتر است جمع میشود.
باکتری های بیهوازی اجباری درصورت بودن اکسیژن قادر به رشد نبوده پس بنابراین در انتهای لوله که کمترین غلظت را دارد متمرکز میشوند.
باکتری های میکروآئروفیل به خوبی در غلظت های کم اکسیژن رشد میکنند ولی
در غلظت های بالا کشته میشوند بنابراین در اواسط رو به بالا جمع میشوند.
همچنین تیوگلیکولات حاوی معرف اکسیداسیون-احیا بنام رسازورین است.
مشخصات ظاهری :
محیط آماده بصورت مایع و به رنگ کاهی مایل به زرد شفاف دیده میشود.
محیط غیرآماده بصورت پودری است و به رنگ کاهی دیده میشود.
مواد تشکیل دهندهی تیوگلیکولات براث:
ال-سیسنئین: 0/05
سدیم کلراید:2/5
گلوکز: 5/5
عصارهجو: 5
کازئین: 15
سدیم تیوگلیکولات: 0/5
آگار: 0/075
Ph نهایی در دمای 25 درجه6/9 الی 7/3 است.
از ال-سیستئین و سدیم تیوگلیکولات بعنوان منبعی استفاده میشود که به کلستریدیوم ها و
سایر بیهوازی های سخت اجازه رشد در این محیط و حتی محیط های هوازی را میدهد.
آگار موجود در این محیط کشت جهت جلوگیری از ورود جریان اتمسفر حاوی اکسیژن به داخل محیط است.
تیوگلیکولات سدیم بعنوان عامل کاهش دهنده عمل میکند .
اثرات سمی نگهدارنده های جیوهای و پراکسید های تشکیل شده در محیط را خنثی میکند و
در نتیجه بیهوازی ها را ترجیح میدهد و محیط را برای آزمایش مواد حاوی فلزات سنگین مناسب میکنند.
سدیم کلراید نیز در حفظ حالت اسمزی نقش دارد و همچنین کازئین منبع تامین کنندهی آمینواسید است.
دستورالعمل استفاده :
29 گرم از پودر محیط کشت را با ترازو اندازهگیری کنید و سپس با 1000 میلیلیتر آب مقطر از پیش آماده شده
در ارلن مایر ترکیب کرده و اجازه دهید به خوبی حل شود.
سپس محلول را در ظرف مناسب ریخته و به مدت یک الی دو دقیقه حرارت دهید.
فقط توجه فرمائید که از حرارت دادن بیش از حد محلول خودداری کنید.
سپس محلول را به مدت 15 دقیقه در اتوکلاو 121 درجه قرار داده و سپس خارج کنید و اجازه دهید
در دمای 40 الی 50 درجه و در محیطی خنک و تاریک نگهداری شود.
هم اکنون محیط کشت آماده میباشد و باید در داخل ظروف استریل شده از قبل بریزید.
لطفا درمورد استفاده از تیوگلیکولات به نکات زیر توجه فرمائید:
ظرف انتخابی برای این محیط، لوله هایی با اندازه 200 در 150 میلیمتر است.
محیط کشت تیوگلیکولات براث را آماده کرده یا بجوشانید و درست قبل از استفاده سرد کنید.
این محیط کشت نباید بیش از یک بار گرم شود.
بهتر است برای نگهداری این محیط از ظروف تیره و در داخل یخچال استفاده کنیم.
کنترل کیفیت:
رشد باکتری ها در محیط مایع بصورت کدورت دیده میشود و هر چه کدورت بیشتر،
تعدادباکتری رشد کرده بیشتر است. در بعضی از موارد ممکن است از قسمت بالایی محیط، رنگ صورتی دیده میشود.
باکتروئیدیس فراژیلسATCC25285: رشد میکند.
باسیلوس سوبتیلیس ATCC6633: رشد میکند.
سودوموناس آئروژینوزا :ATCC9027 رشد میکند.
بعنوان کلام پایانی، من و همکاران هر آنچه که میدانستهایم را با شما به اشتراک گذاشته ایم.
در آخر فراموش نکنید که ما بیصبرانه منتظر نظرات شما هستیم.
جهت مشاهده انواع فیمت محیط کشت لطفا روی کلمه لیست قیمت کلیک فرمایید.
همچنین از بازدید سایت شارلو غافل نمانید!!!!
جهت اخذ مشاوره و خرید تجهیزات آزمایشگاهی با کارشناسان ما در هلدینگ KTG تماس حاصل بفرمایید.
sobhani –
مطلب مفیدی بود