توضیحات

محیط کشت اسپارژین براث 

محیط کشت اسپارژین براث محیط کشتی مایع و غنی می باشد که برای شمارش و تشخیص سودوموناس آئروژینوزا به کار می‌رود.

البته تاکید می‌شود برای تائید بیشتر آزمایش های بیوشیمیایی و سرولوژی انجام داده شود.

سودوموناس آئروژینوزا باسیل گرم منفی هوازی اجباری و غیر تخمیری است که در محیط های بی هوازی

توانایی استفاده از هیچ گونه قندی را ندارد ، البته در بعضی از موارد اگر نیترات یا آرژنین در اختیارش باشد ،

در شرایط بی هوازی هم می‌تواند رشد کرده و از نیترات به عنوان پذیرنده نهایی الکترون استفاده می‌کند.

سودوموناس آئروژینوزا توانایی رشد در آب ها با غلظت کم مواد مغذی دارد.

تعداد باکتری سودوموناس آئروژینوزا در آب آشامیدنی می‌تواند با شکایت درمورد طعم ، بو و کدورت همراه باشد.

سودوموناس آئروژینوزا یک پاتوژن فرصت طلب و همچنین یکی از مهمترین آلاینده های آب است.

آب های معدنی و چشمه در زمان تجاری سازی فاقد سودوموناس آئروژینوزا هستند.

یکی از مهمترین ویژگی های سودوموناس آئروژینوزا داشتن پیگمان های رنگی

( سبز ، زرد ، قهوه ای و قرمز ) است که در تشخیص عفونت ها نیز به ما کمک می‌کند.

که خود این پیگمان ها بعنوان فاکتور های ویرولانس و بیماری‌زا محسوب می‌شود.

کاربرد :

از محیط کشت اسپارژین براث برای تجزیه و تحلیل میکروبیولوژی آب استفاده می‌کنند.

همچنین می‌توان برای جدا کردن باکتری های گرم منفی غیر تخمیری استفاده کرد.

برای تشخیص به روش MPN نیز به کار می‌رود.

اساس کار :

محیط کشت آسپارژین براث محیطی کاملا غنی است و آسپارژین به عنوان تنها منبع ازت و گلیسرول به عنوان منبع کربن شناخته شده است.

اساس کار این محیط کشت بر مبنای هیدرولیز آسپارژین و تولید اسید آسپارتیک است.

برای شناسایی سودوموناس آئروژینوزا از محیط های مختلفی استفاده می‌کنیم مانند بلاد آگار ، مکانکی آگار و….

تست افتراقی سودوموناس و انتروباکتریاسه تست OF و تست اکسیداز  است که بسیار کاربرد دارد.

به طور کلی این مطلب را به خاطر داشته باشید :

ایجاد پیگمان ، رشد بر روی محیط مکانکی آگار با نتیجه منفی لاکتوز ،

تست اکسیداز مثبت و کشت بر روی محیط OF با نتیجه عدم رشد در محیط بی هوازی ،

همگی آزمایش هایی هستند که باعث افتراق سودوموناس از انتروباکتریاسه می‌شود.

 نکاتی درمورد کشت سودوموناس آئروژینوزا که حائز اهمیت است :

کشت باکتری سریع تر از 48تا72 ساعت انجام شود احتمال پاتولوژیک بودن آن بیشتر است.

تطبیق باکتری کشت داده شده با علائم و محل آلودگی که ممکن است نمونه آلوده شده باشد. (درمورد موارد بالینی)

در تست آنتی بیوگرام ، برای هر میکروارگانیسم یک سری آنتی بیوتیک پایه داریم که حتما باید در محیط کشت بگذاریم و

بر اساس آن حساسیت و مقاومت را تشخیص دهیم.

درمورد سودوموناس آئروژینوزا اولین آنتی بیوتیکی که به آن توجه می‌کنیم سیپروفلوکساسین است و

بعد از آن بتالاکتام های ضد سودوموناس است.

همانطور که می‌دانیم سودوموناس آئروژینوزا یکی از مقاوم ترین باکتری ها نسبت به آنتی بیوتیک ها است و

همین موضوع موجب ایجاد معضلات بسیاری در پروسه ی درمان عفونت های ناشی از این باکتری شده است.

مشخصات ظاهری :

محیط کشت غیر آماده : به صورت پودری و به رنگ سفید دیده می‌شود.

محیط کشت آماده : به صورت محلول بی رنگ و شفاف و بدون رسوب دید می‌شود.

مواد تشکیل دهنده‌ی محیط کشت ( برحسب گرم در لیتر)

دی ال آسپارژین:3/000

دی پتاسیم هیدروژن فسفات : 1/000

منیزیوم سولفات هیدرات : 5/000

Ph نهایی در دمای 25 ، 6/90 – 7/20 است.

باید این نکته را در نظر داشته باشیم که آسپارژین براث نسبت به محیط کشت های دیگر،

محیط کشتی بسیار ساده است که حاوی دو نوع نمک فسفات و سولفات منیزیوم است که به عنوان بافر در محیط عمل می‌کنند.

آسپارژین به عنوان منبع تامین کننده‌ی کربن و نیتروژن نیز به کار می‌رود.

منیزیوم سولفات نیز به عنوان یون مورد نیاز در طیف وسیعی از واکنش های آنزیمی بکار می‌رود.

باید این نکته را اضافه کرد که که محیط کشت آسپارژیم براث حاوی هر دو نوع انانتیومر آسپارژین است که

به راحتی توسط سودوموناس هیدرولیز می‌شود.

تهیه نمونه :

از نمونه های آب می‌توانیم استفاده کنیم.

دستورالعمل آماده سازی :

4/24 گرم از پودر محیط کشت را در 1000 میلی لیتر آب مقطر از قبل آماده شده

در ارلن مایر ریخته و خوب بهم بزنید تا کاملا پودر در آن حل شود.

به محلول 8 میلی لیتر گلیسرول اضافه کنید و مجدد شروع به هم زدن بکنید تا کاملا حل شود.

سپس به مدت 1 الی 2 دقیقه در بن ماری یا روی چراغ الکی حرارت داده تا محلولی کاملا شفاف و بی‌رنگ تشکیل شود.

در دمای 121 درجه و به مدت 15 دقیقه اتوکلاو کنید.

اجازه دهید تا محلول در دمای 40 الی 50 درجه خنک شود.

سپس در ظزف استریل مورد نظر خود بریزید و آماده‌ی استفاده می‌باشد.

نکته مهم :

محققان بریتانیایی و آمریکایی دریافتند که مصرف غذاهای حاوی «آسپاراژین (asparagine)» که

در غذاهایی چون مارچوبه، مرغ و غذاهای دریایی وجود دارد، ممکن است سبب پیشرفت و پخش سلول‌های سرطانی در بدن شوند.

براساس نتایج این تحقیق که در ژورنال آکادمیک نیچر منتشره شده،

دانشمندان با آزمایش آسپاراژین در موش‌هایی که دچار سرطان سینه بودند دریافتند که این ماده سبب متاستاز می‌شود.

متاستاز فرآیندی است که سلول‌های سرطانی در بدن بیمار پخش شده و ارگان‌های مختلف بدن را درگیر می‌کند.

آسپاراژین یکی از بیست اسید آمینه‌ اصلی سلول‌های زنده است.

اسیدهای آمینه واحد تشکیل دهنده پروتئین است و در فعالیت‌های سلول‌ها و ارگان‌های بدن نقش اساسی دارند.

تیم تحقیقاتی در مراحل بعدی با مطالعه سابقه بیماران مبتلا به سرطان سینه و رژیم غذایی آنان دریافتند که

مصرف غذاهای حاوی آسپاراژین در انسان نیز سبب پخش سلول‌های سرطانی می‌گردد.

عملکرد این اسید آمینه بدین صورت است که با تغییراتی در شکل و عملکرد سلول‌های سرطانی

به آنان این امکان را می‌دهد که از طریق جریان خون یا لنف به دیگر ارگان‌های بدن وارد شده و آنها را نیز درگیر کنند.

هلدینگ KTG:

جهت مشاهده انواع فیمت محیط کشت ها لطفا روی کلمه لیست قیمت کلیک فرمایید.

همچنین از بازدید سایت شارلو غافل نمانید!!!!

جهت اخذ مشاوره و خرید تجهیزات آزمایشگاهی با کارشناسان ما در هلدینگ KTG تماس حاصل بفرمایید.