جهت مشاوره با شماره 09121223103 تماس حاصل فرمائید
محیط کوک میت براث

محیط کوک میت براث

  • 20کامنت
  • 2021/04/27
  • Admin
  • 11

محیط کوک میت براث

محیط کوک میت براث ( cooked  Meat Broth ), محیط کشتی مایع ، غیر انتخابی و غنی است که

برای پرورش و نگهداری طیف وسیعی از میکروارگانیسم های هوازی و بی هوازی به کار می رود.

به خصوص برای کلستریدیوم ها ( باسیل های بی هوازی اجباری گرم مثبت)  و پرتئو لیتیک های بی هوازی کاربرد دارد.

هم چنین از محیط کشت کوک میت برای تشخیص آلودگی به کلستریدیوم ها در صنایع غذایی نیز استفاده می شود.

وجود بافت قلب در محیط کشت ضروری است و محیط کشت مغذی را برای رشد میکروارگانیسم ها ایجاد می کند و

هم چنین از نظر پروتئین نیز محیط مناسبی را برای رشد میکروارگانیسم های بی هوازی ایجاد می کند

(به علت داشتن گلوتامین و خاصیت ضد احیا کنندگی) .

محیط کوک میت براث

توضیح در ادامه:

تصویر با جواب آزمایش منفی نشان دهنده ی وجود باکتری بی هوازی و درنتیجه عدم تولید گاز است. درحالی که تصویر با جواب آزمایش مثبت, وجود باکتری بی هوازی و به خصوص کلستریدیوم را تایید می کند. بنابراین تخریب بافت قلب رخ می دهد و تولید گاز و کدر شدن محیط کشت را مشاهده می کنیم.

محیط کوک میت براث همچنین به عنوان محیط کشت پشتیبان نیز به کار می رود.

کلستریدیوم ها گروه بزرگی از باسیل های بی هوازی گرم مثبت هستند که

به غیر از کلستریدیم دیفیسل که در انسان مشکل ساز است بقیه گونه ها می توانند هم در حیوان و هم در انسان ایجاد بیماری حاد کنند.

کلستریدیوم ها به دو شیوه عمل می کنند که دانستن آن ها برای کشت بسیار مهم است :

گروه اول که به علت برخورداری از آنزیم های خیلی قوی برای تخریب بافت همبند و

اتصالات آن مثل کلاژن و هیالورونیک اسید ، موجب تخریب و آسیب بافتی می شود و

شامل گروه های متعددی مانند کلستریدیوم پرفرنژنس است

  گروه دوم که تخریب بافتی نمی دهند ولی توکسینی تولید می کند که باعث فلجی و در نهایت مرگ می شود,

مانند کلستریدیوم بوتولینوم ( عامل بوتولیسم ) و کلستریدیوم تتانی ( عامل کزاز یا تتانوس )

به طور کلی برای رشد باکتری های بی هوازی دو شرط لازم است :

  1. فقدان اکسیژن
  2. بافت نکروز شده

ویژگی بافت نکروتیک این است که پتانسیل اکسیداسیون _ احیا در آن به سمت منفی می رود

(مثلا اگر دستگاه بگذاریم و اندازه بگیریم ، 110- میلی ولت را نشان می دهد.) و

در این شرایط ، میکروب هوازی می تواند رشد کند .

این درحالی است که پتانسیل اکسیداسیون _ احیا برای بافت اکسیژن دار و زنده ، مثبت است. ( مثلا +110 ) و

همچنین به دلیل پتانسیل اکسیداسیون احیای منفی تر نسبت به بافت های سالم سبب گسترش بافت نکروتیک می شود

و از ورود اکسیژن به بافت ممانعت می کند.

تاریخچه :

در سال 1916 رابرتسون محیط کشت کوک میت براث را برای استفاده در کشت

برخی از میکروارگانیسم های بی هوازی جدا شده از زخم ایجاد کرد ولی مدل امروزی ،

فرم اصلاح شده ی رابرتسون است. هم چنین برای هضم گوشت نیز استفاده می شود.

در محیط کشت کوک میت براث پروتئولیز( هیدرولیز پیوند های پپتیدی است و یک روش تنظیم فرایند های سلولی است)

گوشت که به عنوان یک کلید برای شناسایی آن استفاده می شود.

سیاه شدن محیط با متلاشی شدن گوشت  مشاهده می شود که نشانه ی پروتئولتیکی می باشد ، و

به منظور کسب نتیجه ی دلخواه از آزمایش است.

از نشانه های رشد میکروارگانیسم های بی هوازی در محیط کشت می توان به کدر شدن و تشکیل حباب اشاره کرد.

توجه شود که  برخی گونه های کلستریدیم توانایی ساکارولیتیک ( تجزیه ی قند ها ) و

تولید اسید بوتیریک ، الکل و استیک اسید  و برخی دیگر نیز توانایی پروتئولیتیک و

تولید آمینو اسید را دارند و بعضی دیگر هر دو را دارند.

گونه های کلستریدیوم و ارگانیسم های پروتئولیتیک که بافت قلب را هیدرولیز کرده و باعث تولید اسید آمینه می شود.

کنترل کیفیت :

کلستریدیوم پرفرنژنس ( عامل بیماری قانقاریا ) ATCC13124 : رشد همراه با تولید گاز

کلستریدیوم آسپوروژنز ATCC11437  : رشد به همراه تولید گاز سنگین و ممکن است سیاه شدن محیط را نشان دهد.

انتروکوکوس فکالیس ATCC29212  : به خوبی رشد می کند.

استرپتوکوکوس پونومونیه ATCC6303  : به خوبی رشد می کند.

محیط کوک میت براث

تصویر a : کنترل ، تصویر b : کلستریدیوم پرفریژنس ، تصویر c : کلستریدیوم آسپوروژنز

 

محیط کشت کوک میت حاوی ترکیبات زیر است ( بر حسب گرم در لیتر ) :

Beef Heart  : 98/0

 پپتون :20/0

سدیم کلراید : 5/0

دکستروز ( گلوکز ) : 2/0

Ph نهایی در دمای 25 درجه 7/2 ±  0/2 است.

Beef Heart  دارای گلوتامین است که ماده ای کاهنده است و اجازه ی رشد را به میکروارگانیسم های

بی هوازی می دهد ، دکستروز ( گلوکز ) که باعث رشد سریع و سنگین باکتری های بی هوازی در زمان کوتاه می شود

و همچنین منبع تامین کننده ی انرژی مورد نیاز میکروارگانیسم است ،

سدیم کلراید حالت اسمزی محیط کشت را فراهم می کند ،

پپتون به عنوان منبع تامین کننده ی نیتروژن، کربن و نیز تامین کننده ی  آمینو اسید های لازم محیط است.

مشخصات ظاهری :

محیط کشت آماده : مایع ، کهربایی و شفاف است و دارای دانه های نا محلول است.

محیط کشت غیر آماده : به صورت پودر و ذرات همگن دیده می شود که دارای دانه های نامحلول است.

تهیه نمونه :

نمونه را  می توان از خون ، مواد غذایی و آب و لبنیات تهیه کرد.

آماده سازی محیط کوک میت براث :

12/5 گرم از پودر محیط کشت کوک میت را اندازه گیری نموده و با 1000 میلی لیتر آب مقطر که

از قبل داخل ارلن مایر و بطری ریخته شده است ،  سوسپانسون کنید ( اجازه دهید ذرات محیط کشت کاملا در آب حل شود.)

سپس  با پنبه درب ارلن مایر را مسدود کرده و آن را یا روی سه پایه چراغ گازی و یا بن ماری به مدت یک الی دو دقیقه  حرارت می دهیم.

( توجه شود که از حرارت دادن زیاد و سوخته شدن محلول خودداری کنید).

بعد از آن که مایع جوشید ، مایع را با تکه کاغذ آلمینیومی روی پنبه را بپوشانید و

به مدت 15 دقیقه و دمای 121 درجه اتوکلاو کنید تا استریل شود و سپس اجازه دهید در دمای40 الی 50 درجه خنک شود.

سپس با شرایط آسپیک درون ظروف نهایی تقسیم کنید و حال محیط آماده ی مصرف است.

هر محیط کشت را طبق دستورالعمل نوشته شده روی ظرف آن آماده کیند.

شرایط نگهداری و ماندگاری :

محیط آماده شده را در دمای اتاق و در تاریکی با درپوش های محکم تا 6 ماه  می توان نگه داشت.

محیط پودری محیطی کم آب است که باید در دمای30 درجه سانتی گراد نگهداری شود

و قبل از تاریخ انقضا بر روی چسب استفاده گردد.

 

منبع : کمپانی شارلو ارایه دهنده انواع محیط کشت های میکروبی است.

برای اطلاع از  سایر محیط کشت های میکروبی  و همچنین قیمت محیط کشتها,

لطفا مطلب محیط کشت کیولب را مطالعه نمایید.

برای بدست آوردن اطلاعات بیشتر در مورد قیمت محیط کشت  به سایت شرکت کیمیا طب گستر مراجعه فرمایید

و لیست قیمت quelab  را مطالعه بفرمایید .

اگر به دنبال بهترین کیفیت محیط کشت‌ها‌ی میکروبی و سلولی با نازل‌ترین قیمت‌ها از معتبرترین کمپانی‌ها هستید

با کارشناسان شرکت کیمیا طب گستر تماس حاصل فرمایید.

شماره‌های تماس عبارتند از:

44276021 – 021

44276022 – 021

44276023 – 021

44276024 – 021

44276025 – 021

0912-1223103

0902-4809888 (پیام در واتساپ)

 

برای امتیاز به این نوشته کلیک کنید!
[کل: 1 میانگین: 1]