جهت مشاوره با شماره 09121223103 تماس حاصل فرمائید
محیط کشت EC براث

محیط کشت EC براث

  • 20کامنت
  • 2021/04/26
  • Admin
  • 16

محیط کشت EC براث

محیط کشت EC براث  ( EC BROTH) محیط کشتی مایع ، غنی و انتخابی

(به دلیل انتخابی بودن رشد باکتری های غیر کلی فرم را به حداقل می رساند )  است که

برای تشخیص کلی فرم ها در دمای 37 درجه و اشرشیای کلای در دمای 44/5 درجه به کار می رود.

محیط کشت EC  براث همان محیط کشت ای کولای براث است.

محیط کشت EC  براث برای تشخیص بیماری هایی که در ارتباط با انسان است به کار نمی رود.

باکتری های گرم مثبت به خصوص استرپتوکوک ها و باسیل ها  به دلیل وجود نمک های صفراوی

در محیط کشت  EC براث نمی توانند رشد کنند.

منظور از کلی فرم ها ، میکروارگانیسم هایی بی هوازی و هوازی اختیاری هوازی  هستند که

می توانند در شرایط هوازی و در دمای 35 ± 0/5 و 37± 0/5 و در محیط لاکتوز مایع رشد کرده و

در مدت 48 ساعت تولید اسید و گاز  کنند.

برای شناسایی کلی فرم ها محیط هایی مانند EMB ،  لاکتوز براث و EC  براث ، برلیانت گرین  و ….. به کار می رود.

اشرشیای کلای باسیل گرم منفی بی هوازی اختیاری است که

جزو خانواده انتروباکتریاسه است که در آب و مواد غذایی وجود دارد.

همچنین اشرشیای کلای به عنوان فلور نرمال در دستگاه گوارش انسان یافت می شود.

برای شناسایی اشرشیای کلای از محیط کشت های مکانکی آگار ، EMB و …. استفاده می شود که

اساس همگی آن ها تخمیر لاکتوز است.

فرمول اصلی محیط کشت  EC براث توسط Perry  و Hajna ابداع شد که

تریپتوز موجود در آن به عنوان منبع نیتروژن به کار می رفت و بعد ها تریپتون جایگزین آن شد.

از  EC براث برای شمارش احتمالی ای کلای در شیر و فراورده های لبنی با استفاده از تکنیک MNP امکان پذیر است.

تهیه نمونه :

از نمونه های آب ، مواد غذایی ، بالینی و  مدفوع استفاده می کنند.

وجود اشرشیای کلای در آب نیز به عنوان شاخص از  آلودگی در نظر گرفته می شود.

اساس تشخیص :

اساس تشخیص ای کلای و کلی فرم های مدفوع ، تخمیر لاکتوز و تولید اسید و گاز

در طی 24 الی 48 ساعت در دمای 35 الی 44 درجه می باشد.

گاز تولیدی که در اثر تخمیر لاکتوز ایجاد می شود با لوله های دورهام نشان داده می شود.

تشخیص کلی فرم ها :

تشخیص کلی فرم های مدفوعی طی دو مرحله ی احتمالی و تاییدی  انجام می شود .

در مرحله ی احتمالی از محیط کشت لاکتوز براث استفاده می کنیم.

در مرحله ی تاییدی  از محیط کشت برلیانت گرین و EC براث استفاده می شود .

بدین ترتیب که از نمونه های مثبت مرحله اول (لوله های گاز دار ) به وسیله آنس یا لوپ

از محیط کشت لاکتوز براث به این دو محیط انتقال می دهیم .

لوله برلیانت گرین را در داخل انکو باتور و EC براث را در داخل بن ماری 44/5  درجه قرار می دهیم .

پس از 24 ساعت نتایج را بررسی می کنیم .

اگر هر دو لوله منفی بودند یعنی آب مشکلی نداشته و مرحله اول که مثبت شده بود

باکتری های دیگری غیر از کلی فرم بوده اند و آب قابل شرب است .

ولی اگر لوله برلیانت مثبت و لوله EC منفی باشد آب دارای کلی فرم بوده و

میزان MPN گزارش می شود ولی از نظر کلی فرم مدفوعی(  اشرشیاکلی ) منفی است .

در صورتی که هر دو لوله برلیانت و EC هر دو مثبت باشد علاوه  برکلیفرم

آب دارای  ای کلای نیز خواهد بود و آب غیر قابل شرب می شود .

تولید گاز حاصل از تخمیر در مدت زمان 24 ساعت یا کمتر نشان دهنده ی واکنش مثبت کلی فرم مدفوع است.

مشخصات ظاهری محیط کشت EC براث:

محیط کشت آماده:به صورت مایع و به رنگ کاهی دیده می شود.

محیط کشت کم آب :  به صورت پودر و به رنگ سفید است.

محیط کشت EC براث حاوی ترکیبات زیر است ( برحسب گرم در لیتر )

تریپتون 20

لاکتوز 5

نمک های صفراوی 1/5

دی پتاسیم فسفات 4

مونو پتاسیم فسفات1/5

سدیم کلراید 5

PH نهایی در دمای 25 درجه 6/9  ± 0/2 است.

تریپتون به عنوان منبع نیتروژن و کربن است ،

نمک های صفراوی مانع از رشد باکتری های گرم مثبت می شود  ،

سدیم کلراید حالت اسمزی محیط را حفظ می کند.

دی پتاسیم فسفات نیز به حالت بافری محیط را ایجاد می کند.

لاکتوز انرژی مورد نیاز میکروارگانسم ها را تامین می کند.

دستورالعمل تهیه محیط کشت EC براث :

37 گرم از پودر محیط کشت را روی ترازو اندازه گیری کرده و در 1000 میلی لیتر آب مقطر از پیش آماده شده

در ارلن ریخته و خوب به هم بزنید تا پودر کاملا در آب حل شود.

سپس محلول را به مدت 1الی 2 دقیقه در بن ماری یا چراغ الکلی حرارت دهید .

(دقت کنید که محلول نجوشد) و سپس در اتوکلا 121 درجه و به مدت 15 دقیقه قرار دهید

آنگاه در دمای 40 الی 50 درجه خنک شود. و سپس در داخل لوله های مورد نظر ریخته و آماده ی استفاده است.

توجه شود که محیط هایی که باید در لوله تهیه گردند قبل از استریلیزاسیون

به مقدار مناسب در لوله ریخته شده و سپس اتوکلاو می گردند.

همچنین محیط هایی که باید در پلیت تهیه گردند بعد از اتوکلاو و در کنار شعله

و تحت  شرایط استریل در پلیت تقسیم می گردند.

3 تا 5 درصد پلیت های تهیه شده قبل از استفاده باید به مدت 48 ساعت و

در دمای 37 درجه انکوبه گردند تا استریل بودن آن ها مورد تایید قرار گیرد.

محیط های مورد نیاز برای کشت مدفوع :

بلاد آگار

مکانکی آگار

EMB

TSI

TSB

SIM

VP

مولر هیلتون آگار

کروم آگار

کنگورد

کنترل کیفیت :

اشرشیای کلای ATCC25922 : رشد می کند

سودوموناس آئروژینوزا ATCC27853  : رشد نمی کند

 

منبع : کمپانی شارلو ارایه دهنده انواع محیط کشت های میکروبی است.

برای اطلاع از  سایر محیط کشت های میکروبی  و همچنین قیمت محیط کشتها,

لطفا مطلب محیط کشت کیولب را مطالعه نمایید.

برای بدست آوردن اطلاعات بیشتر در مورد قیمت محیط کشت  به سایت شرکت کیمیا طب گستر مراجعه فرمایید

و لیست قیمت quelab  را مطالعه بفرمایید .

اگر به دنبال بهترین کیفیت محیط کشت‌ها‌ی میکروبی و سلولی با نازل‌ترین قیمت‌ها از معتبرترین کمپانی‌ها هستید

با کارشناسان شرکت کیمیا طب گستر تماس حاصل فرمایید.

شماره های تماس عبارتند از :

44276021 – 021

44276022 – 021

44276023 – 021

44276024 – 021

44276025 – 021

0912-1223103

0902-4809888 (پیام در واتساپ)

برای امتیاز به این نوشته کلیک کنید!
[کل: 1 میانگین: 1]