جهت مشاوره با شماره 09121223103 تماس حاصل فرمائید
محیط کشت بولتون براث

محیط کشت بولتون براث

  • 20کامنت
  • 2021/05/16
  • Admin
  • 6

محیط کشت بولتون براث

محیط کشت بولتون براث ( Bolton broth ) یا به اختصار  (BB ) :محیط کشت مایع و انتخابی است که

برای غنی سازی و تمایز کمپیلوباکتریها از مواد غذایی  به کار می رود.

همچنین محیط کشت بولتون براث حاوی مواد مغذی برای کمک به احیای سلول های آسیب دیده استفاده می شود.

محیط کشت بولتون براث مناسب ترین محیط کشت برای شناسایی کمپیلو باکتریها می باشد.

البته از سوی دیگر تشخیص کمپیلو باکتر به دلیل میکروآئروفیل بودن و نیاز به سیستم های بی هوازی بسیار وقت گیر و

پر هزینه می باشد و تامین این شرایط آسان نمیباشد.

محیط کشت بولتون براث برای جلوگیری از نیاز به جو میکروآئروفیل تعبیه شده است.

اختصاصی ترین محیط برای شناسایی کمپیلو باکتر ها محیط کشت SKIRROW است که محیطی انتخابی

است که در سال 1972 به جهت افزایش نقش کمپیلو باکتر ها در بیماری زایی توسط اسکیرو ابداع شد.

کمپیلو باکتر ها :

کمپیلو باکتر ها باسیل های گرم منفی کوچک و خمیده ( مارپیچی )  و میکروآئروفیل هستند.

(زمانی است که میزان اکسیژن محیط کم و میزان کربن دی اکسید  محیط بالا باشد,

می توانیم انکوباتور های خاصی را در این شرایط تنظیم کرده و پلیت حاوی این باکتری ها را برای رشد ،

درون این انکوباتور ها قرار دهیم ،

هر چند ایجاد این شرایط در آزمایشگاه دشوار است لذا معمولا جداسازی نمی شوند.)

این باکتری ها متحرک بوده و حرکتشان در بیماری زایی شان بسیار موثر است.

محیط کشت بولتون براث

کمپیلو باکتر در زیر میکروسکوپ

برای شناسایی کمپیلو باکتر از روش های معمول آزمایشگاهی نمی توان استفاده کرد.

کمپیلو باکتر ها (به خصوص کمپیلو باکتر ژژونی و کمپیلو باکتر کولی ) از شایع ترین علل گاسترو انتریت های روده ای هستند.

کمپیلو باکترها ممکن است در شیر ، آب تصفیه نشده ، غذای نامناسب و گوشت های نیمه پخته ، مرغ و صدف وجود داشته باشد.

کمپیلو باکتر ها در اثر فراوری و نگه داری مواد غذایی آسیب می بیند.

کمپیلو باکتر  ژژونی و کمپیلو باکتر آپسالینس باعث بیماری سندروم گلین باره  ، آرتریت و انتروگاستریت های باکتریایی می شود.

سندروم گلین باره ، اختلال خودایمنی در نورون های محیطی است که

به صورت ضعف متقارن و پیشرونده (در طی چند روز ) بروز می کند و بهبودی کامل پس از ماه ها به دست می آید.

مهم ترین دلیل ایجاد این بیماری ، واکنش متقاطع است.

به علت شباهت LOS  این باکتری ها با گانگلوزید ها ، واکنش متقاطع رخ می دهد و

آنتی بادی هایی که علیه سویه های خاصی از کمپیلو باکتر تولید می شوند ،

می توانند باعث آسیب بافت نورون ها در سیستم اعصاب محیطی شوند.

در این بیماری برحسب اینکه چه نورونی درگیر شود عوارض آن متفاوت است .

برای مثال  فرد دچار ضعف در سیستم اعصاب می شود ،

ضعف دست ها و پا ها و هوشیاری دچار مشکل می شود.

توجه شود که کمپیلو باکتر ها می توانند از فیلتر 0/45 میکرون عبور می کنند که این هم باز به کشت این باکتری کمک می کند.

(چون خیلی از این باکتری ها نمی توانند از این فیلتر عبور کنند ، بنابرابن میزان آلودگی کاهش پیدا کرده و

کشت کمپیلو باکتر پس از عبور از این فیلتر راحت تر می شود.)

از بین 33 گونه ی شناخته شده تنها 9 گونه از آن ها پاتوژن های شایع انسانی هستند مانند

کمپیلو باکتر فتوس ، کمپیلو باکتر ژژونی و کمپیلو باکتر کولی می توان نام برد.

همان طور که قبلا ذکر شده است ، کمپیلو باکتر ژژونی ، سالمونلا و ویبریو همگی به اسید معده حساس هستند.

کمپیلو باکترها به انواع مختلفی از آنتی بیوتیک ها حساس هستند مانند ماکرولید ها

( اریترومایسین ، کلاریترومایسین  و آزیترومایسین ) ، تترا سیکلین ، آمینوگلیکوزید ها ،

کلرامفنیکل ، فلوروکینون ، کلیندامایسین ، آموکسی سیلین و امیپینم می توان نام برد.

از بین کمپیلو باکتر ها ، کمپیلو باکتر ژژونی ، می تواند در دمای 42 درجه رشد کند

(در این دما بهتر از 37 درجه رشد می کند. و در دمای زیر 30 درجه قادر به فعالیت نیست .)

پس اگر به این باکتری مشکوک باشیم با قرار دادن نمونه در این دما ، احتمال رشد خیلی از باکتری ها را کم می کنیم و

به صورت انتخابی اجازه می دهیم تا این باکتری رشد کند.

تشخیص آزمایشگاهی :

انتقال به آزمایشگاه و درون محیط کری بلر انجام شود.

اگر رنگ آمیزی گرم های عادی برای کمپیلو باکتر انجام دهیم نمی توانیم آن ها را ببینیم ،

پس تغییراتی را در این رنگ آمیزی ایجاد کرده اند ، از سافرانین استفاده نمی کنند و

از کربن فوشین یا فوشین بازی استفاده می کنند.

با زمان یک دقیقه یا بیشتر که کمک میکند رنگ پذیری باکتری بیشتر می شود.

(در کل فوشین نسبت به سافرانین باکتری های گرم منفی را پر رنگ تر و قرمز تر می کند.)

این نکته را در نظر داشته باشیم که کشت کمپیلو باکتر ها دشوار است و

برای تشخیص کاربرد چندانی ندارد مگر در موارد تحقیقاتی و لذا روش های سرولوژیک و یا مولکولی مناسب ترند.

در محیط کشت حتما باید خون وجود داشته باشد و

به آن آنتی بیوتیک اضافه می کنند . همچنین به آن شاربن اضافه می کنند که

رادیکال های آزاد اکسیژن را خنثی کند و کشت را در 42 درجه و با کربن دی اکسید زیاد قرار می دهند.

مصرف این باکتری ها توسط انسان می تواند منجر به طیف وسیعی از بیماری های بالینی شود.

محیط کشت بولتون براث از مواد زیر تشکیل شده است (گرم در لیتر ) :

پپتون گوشت 10/0

عصاره جو 5/0

سدیم کلراید 5/0

آلفا گلوتامیک اسید 1/0

سدیم پیروات 0/5

سدیم کربنات0/6

Haemin   : 0/01

از سدیم سولفات و سدیم پیروات برای از بین بردن ترکیبات سمی که ممکن است در محیط کشت ایجاد شود ،

جلوگیری می شود هم چنین این افزودنی ها تحمل هوایی محیط کشت را افزایش می دهد ،

از سدیم کلراید برای حفظ حالت اسمزی استفاده می کنیم .

آنتی بیوتیک های موجود  در محیط کشت ( ونکومایسین ، تریمتوپریم ، سیکلو هگزامید و سفاپرازون )

باعث بهینه شدن روند تشخیص کمپیلو باکتر می شود ،

از پپتون گوشت برای تامین کربن و نیتروژن و اسید آمینه استفاده می شود و

عصاره جو تیز تامین کننده ی ویتامین های گروه b است.

مشخصات ظاهری :

محیط غیر آماده : پودر شکل است و کاهی رنگ است.

محیط شکل آماده : مایع شکل  است و کاهی رنگ است که حاوی ذرات سیاه است.

کنترل کیفیت :

کمپیلو باکتر ATCC 29428  :  نتیجه آن مثبت است و رنگ کلنی ایجاد شده خاکستری است.

کمپیلو باکتر ATCC25922  : نتیجه ی کشت منفی است.

دستورالعمل استفاده از محیط کشت بولتون براث :

13/5 گرم از پودر محیط کشت را در 1000 میلی لیتر آب مقطر  از قبل آماده شده در ارلن مایر ریخته و

سوسپانسیون شود. ( به طوریکه ذرات کاملا در آب حل شود. )

سپس محلول را به مدت 1الی 2 دقیقه روی چراغ الکلی یا بن ماری حرارت داده به طوری که محلول نجوشد.

سپس به مدت15 دقیقه در اتوکلاو 121 درجه استریل کرده و سپس اجازه دهید در دمای 40 الی 50 درجه خنک شود.

آنگاه  درون ظرف درپیچدار استریل ریخته شود. حال محیط کشت آماده استفاده است.

یاد آوریم شویم که  محیط کشت بولتون براث باید حاوی خون باشد که

به این منظور 25  میلی لیتر خون اسب لیز شده را به محلول اضافه می کنند.

هم چنین  ویال rehydrate Bolton selective    را به محیط کشت اضافه می کنند.

 

منبع : کمپانی شارلو ارایه دهنده انواع محیط کشت های میکروبی است.

برای اطلاع از  سایر محیط کشت های میکروبی  و همچنین قیمت محیط کشتها,

لطفا مطلب محیط کشت کیولب را مطالعه نمایید.

برای بدست آوردن اطلاعات بیشتر در مورد قیمت محیط کشت  به سایت شرکت کیمیا طب گستر مراجعه فرمایید

و لیست قیمت quelab  را مطالعه بفرمایید .

اگر به دنبال بهترین کیفیت محیط کشت‌ها‌ی میکروبی و سلولی با نازل‌ترین قیمت‌ها از معتبرترین کمپانی‌ها هستید

با کارشناسان شرکت کیمیا طب گستر تماس حاصل فرمایید.

شماره های تماس عبارتند از :

44276021 – 021

44276022 – 021

44276023 – 021

44276024 – 021

44276025 – 021

0912-1223103

0902-4809888 (پیام در واتساپ)

برای امتیاز به این نوشته کلیک کنید!
[کل: 0 میانگین: 0]