جهت مشاوره با شماره 09121223103 تماس حاصل فرمائید
محیط کشت بروسلا آگار

محیط کشت بروسلا آگار

  • 20کامنت
  • 2021/06/26
  • Admin
  • 48

محیط کشت بروسلا آگار

محیط کشت بروسلا آگار ,از یک محیط کشت پایه ( محیطی که دارای حداقل مواد مغذی مانند نوترینت براث و نوترینت آگار) است

که با اضافه کردن پنج درصد سرم خون یا گوسفند به سرم دکستروز آگار تبدیل می گردد.

پلیت های کشت داده شده را باید در محیطی با 10 الی 20 درصد گاز کربن دی اکسید و در دمای 35 درجه به مدت 10 روز انکوبه کرد.

کلنی بروسلا ریز ، صاف و شفاف می باشد و قطر آن از 1 میلی متر به 2 میلی متر افزایش می یابد.

برای تعیین حساسیت بروسلا ها به رنگ می توان از محیط سرم و دکستروز آگار استفاده کرد.

محیط کشت مناسب برای رشد باکتری های سخت رشد ,مانند گونه های بروسلا ، استرپتوکوک ها و پنوموکوک ها می باشند.

گاز پپتون موجود در یک محیط به عنوان منبع غنی از نیتروژن و

عصاره مخمر موجود در محیط به عنوان تامین کننده ی ویتامین های گروه ب می باشد.

قند موجود در محیط نیز به عنوان منبع انرژی میکروارگانیسم می باشد.

این محیط با اضافه کردن پنج درصد سرم خون اسب یا گوسفند به یک محیط بسیار مغذی تبدیل می شود.

با اضافه نمودن آنتی بیونیک مناسب می توان به عنوان محیط انتخابی بروسلا از آن استفاده کرد.

بروسلا به افتخار Sir Daind Beuce  ( که اولین بار ارگانیسم را کشف کرد) این نام را گرفت.

بروسلا انگل اجباری درون سلولی ( به نوعی از انگل ها که در داخل بدن میزبان زندگی می کنند) بوده و

به طور تصادفی انسان را درگیر می کند  و به طور مشخص جایگاه آن در درون سلول است.

شش گونه برای بروسلا وجود داشته که چهار گونه آن عامل بیماری در انسان می باشد.

از بروسلا آگار می توان به عنوان پایه ای برای جداسازی کمپیلوباکتر استفاده کرد.

بروسلا عامل بیماری بروسلوز (تب مالت) است که از مهم ترین بیماری های مشترک بین انسان و دام است.

و از طریق مصرف محصولات لبنی  آلوده انتشار می یابد که بیشتر در دامداران ، کشاورزان  و

کسانی که به مناطق آلوده سفر می کنند ایجاد می شود. بیشتر در مردان شایع است.

مخزن گونه هایی بیماری زا بروسلا در انسان:

بروسلا کوکو باسیل گرم منفی بوده که اغلب به صورت نا منظم رنگ می گیرد ولی

توسط آکریدین اورنج  به خوبی رنگ می گیرد.

این باکتری هوازی اجباری ، کاتالاز و اکسیداز مثبت بوده و از نظر متابولیک غیر فعال است.

توجه شود بین بروسلا ، یرسینیا انترکولیتیکاO9  ، سالمونلای O3 ،ای کلای O157 ، ویبریو کلرا  و

فرانسیسلا تولارنسیس قرابت آنتی ژنیک  وجود دارد و احتمال مثبت شدن تست رایت در هر یک از عفونت های فوق وجود دارد.

(واکنش متقاطع داده و در نتیجه آزمایش رایت می تواند در اثر ابتلا به این عوامل به طور کاذب مثبت می شود.)

تست رایت  تشخیص قطعی بیماری تب مالت (بروسلوز)  است که توسط یک آزمایش خون مشخص می شود و

قطعی ترین راه تشخیص تب مالت کشت خون و یا مغز استخوان و جداسازی بروسلا از این نمونه ها می باشد که

در آن اندازه گیری آنتی بادی های Ig A ، Ig M  و Ig G  است.

تست هایی که برای تشخیص بروسلوز به کار می رود آزمایش کومبس رایت یا 2EM است که در ایران رایج و مقرون به صرفه است.

دوره ی این بیماری 5 تا 60 روز ( گاهی ممکن است چندین ماه طول بکشد.)

اطرافیان و اعضای خانواده ی فرد بیمار که ممکن است غذای آلوده خورده باشند باید مورد بررسی قرار گیرد.

خوردن شیر و محصولات لبنی و غیر پاستوریزه شایع ترین راه درگیری انسان به بروسلا محسوب می شودو

پنیر تولید شده از شیر بز پاستوریزه نشده  منبع شایع بروسلوز می باشد.

سرولوژی محیط کشت بروسلا آگار

جهت رد یابی عفونت بروسلا می توان از تست سرولوژیکی رایت بهره برد.

در این تست از بروسلا ابورتوس به عنوان آنتی ژن استفاده می شود.

طی هفته اول ابتلا ( فرم حاد بیماری) آنتی بادی از کلاس Ig M افزایش می بابد و طی سه ماه به حداکثر میزان خود می رسد.

در طی بیماری مزمن تیتر آن کاهش می یابد. در طی سه هفته پس از شروع فرم حاد میزان Ig G  افزایش یافته  و

پس از 6_8 هفته به حداکثر میزان خود می رسد و در طی دوران مزمن بیماری تیتر آن بالا می ماند.

سطح Ig A موازی با Ig G  تغیر می کند.

از آنجایی که آنتی ژن مورد استفاده در تست های سرولوژیک بروسلا ابورتیس می باشد و

بروسلا کانیس فاقد آنتی ژن A و M است ,لذا از طریق تست های سرولوژیک آگلوتیناسیون لوله ای نمی توان

عفونت با برویلا کانیس را ردیابی نمود.تیتر های آگلوتنین Ig G بیش از 60/1 بیانگر عفونت فعال است.

افرادی که با واکسن وبا ایمن شده اند ممکن است تیتر های آگلوتنین در برابر بروسلا ایجاد نمایند.

و برای افرادی که علائم بالینی بروسلوز را داشته ولی سرولوژی آن منفی است می بایست

از کومبس رایت ( جهت جستجوی آنتی بادی بلوکان) بهره برد.

آنتی بادی بلوکان از جنس Ig A  بوده و در آگلوتیناسیون Ig G   و Ig Mاختلال ایجاد نموده و

باعث منفی شدن تست سرولوژی در رقت های پائین سرم (پدیده پروزون) می گردد.

در مرحله حاد عفونت آنتی بادی های بلوکان ظاهر شده و مستقل از عفونت تا سال ها پایدار می شود.

جهت ردیابی عفونت مزمن فعال بروسلوز از تست 2_مرکاپتواتانول (2EM) استفاده می شود.

آگلوتنین های تولارمی و یرسینیا انتروکولتیکا O9 با بروسلا واکنش متقاطع دارند.

راه های کسب عفونت در انسان عبارتند از:

دستگاه گوارش (خوردن شیر و محصولات لبنی آلوده و غیر پاستوریزه)

عفونت های مخاطی (ذرات آلوده)

 گونه های بروسلا آگار

بروسلا ملی تنسیس ( عفونت حاد و بسیار کشنده با عوارض زیاد ایجاد می کند.)

بروسلا سوئیس (عفونت مزمن و تخریب کننده همراه با ضایعات و گرانولوم های چرکی)

بروسلا ابورتوس ( عفونت خفیف بدون عارضه چرکی )

بروسلا کانیس (عفونت خفیف)

به دلیل جایگاه داخل سلولی بروسلا، ریشه کن نمودن آن از میزبان به سهولت امکان پذیر است.

برای دستیابی به نتایج بهتر ، درمان باید طولانی مدت باشد.

بروسلا ها در کشت به کندی رشد نموده ( یک هفته و یا بیشتر) و معمولا به محیط های رشد پیچیده تری نیاز دارند.

و برای جداسازی باکتری از محیط کشت بروسلا آگار می توان بهره برد.

محیط بروسلا آگار محیطی بسیار غنی بوده و برای ایزولاسیون بروسلا بسیار مناسب است.

بروسلا ها به راحتی بر روی محیط کشت خون رشد می کند و

باید در اتمسفر هشت الی ده درصد کربن دی اکسید و در دمای 35_37  درجه انکوبه شوند.

ارائه نتیجه منفی پس از سه هفته نگهداری محیط های کشت صورت میگیرد و

منفی بودن کشت خون از نظر بروسلا،  ابتدا به بروسلوز نفی کرده و ممکن است بیمار در مرحله ی مزمن باشد که

جداسازی باکتری در این مرحله مشکل بوده و تنها در پنج درصد از چنین موارد جداسازی صورت می گیرد.

قطر کلنی بروسلا کمتر از 1 میلی متر بوده و کلنی آن غیر همولیتیک است.

کلنی ها به دو شکل R  و S  وجود دارد . کلنی S با تجمع D_ آلانین و کاهش اکسیژن به فرم R  تبدیل می شوند.

تمامی اقدامات بر روی نمونه و انجام کشت می بایست در زیر هود لامینار صورت بگیرد.

بروسلا ها اوره آز مثبت بوده و در بروسلا سوئیس و برخی دیگر از سویه های بروسلا  ملی تنسیس

در طی کمتر از 5 دقیقه پس از تلقیح باکتری به محیط اوره واکنش مثبت می شود.

اوره آز در سایر گونه ها در طی چند ساعت تا 24 ساعت مثبت می شود.

جهت تعین گونه بروسلا، از حساسیت به رنگ فوشین ویتونین ،

حساسیت به فاژ، هیدرولیز اوره ، تولید H2S و آنتی سرم استفاده می شود.

محیط کشت بروسلا آگار  از ترکیبات زیر تشکیل شده است:

کازئین پپتون 15 گرم در لیتر

مالت پپتون 5 گرم در لیتر

سدیم کلراید 5 گرم در لیتر

عصاره مخمر 2 گرم در لیتر

دکستروز (گلوکز) 1 گرم در لیتر

سدیم بی سولفات 0/1 گرم در لیتر

آگار 15 گرم در لیتر

آب مقطر 1000 میلی لیتر

بروسلا آگار به دلیل داشتن پپتون، دکستروز و عصاره مخمر از رشد میکروارگانیسم های سریع پپتون ،

نیتروژن آلی را تامین می کنند و عصاره مخمر منبع قوی ویتامین های ب است،

از دکستروز (گلوکز) به عنوان منبع انرژی استفاده می شود.

بی سولفات سدیم یک عامل کاهنده است و کلرید سدیم تعادل اسمزی را حفظ می کند و

منبعی از الکترولیت های ضروری است و آگار ماده جامد کننده در بروسلا آگار است.

دستورالعمل محیط کشت بروسلا آگار

43 گرم از پودر محیط کشت را در یک لیتر آب مقطر سوسپانسیون شود. ( مرتبا هم بزنید) و آن را گرم کنید.

به مدت یک دقیقه بجوشانید تا محیط کشت کاملا در آب حل شود.

سپس به مدت 15 دقیقه و در دمای 121 درجه اتوکلاو کنیدآنگاه درون ظرف استریل  بریزید.

برای به دست آوردن کلنی های جدا شده از نمونه ها به روش های استاندارد عمل کنید و

از آنجا که بسیاری از عوامل بیماری زا به دی اکسید کربن در جداسازی اولیه نیاز دارند،

صفحات را در دمای 35 الی 37 درجه به مدت 24 الی 72 ساعت در محیط هوازی همراه با دی اکسید کربن انکوبه کنید و

آن را تا دمای 45 _50 درجه خنک کنید همچنین در صورت نیاز به آن 5 تا 10 درصد خون د فیبرینه استریل اضافه کنید.

( خون د فیبرینه خونی است که به صورت آسپتیک از گوسفند سالم گرفته شده و به دلیل حذف فیبرین ، انعقاد در آن انجام نمی گیرد)

با افزودن خون، از بروسلا آگار برای تعیین واکنش همولیتیک باکتریایی استفاده می شود.

بروسلا آگار هم چنین توسط APHA  برای جداسازی گونه های بروسلا از غذا توصیه می شود.

با افزودن پنج درصد خون سرم اسب، از این محیط در روش های کیفی برای جداسازی و

پرورش میکروارگانیسم های غیر سریع و سریع و از انواع نمونه های بالینی و غیر بالینی میتوان استفاده کرد.

بروسلا آگار محیطی جامد است که برای استفاده در روش های کیفی و جداسازی و کشت گونه های بروسلا توصیه می شود.

( بروسلا از آلوده کننده های بالقوه ی محصولات لبنی است.)

خصوصیات فیزیکی محیط کشت بروسلا آگار

محیط کم آب پودر کاهی رنگ و همگن است.

محیط آماده ژل مانند و بی رنگ است.

شرایط نگهداری محیط کشت بروسلا آگار

محیطی کم آب است و در دمای 30 درجه نگهداری می شود.

صفحات آماده شده آگار را در دمای 2 الی 8 درجه نگه داری کنید.

احتیاط

بروسلا یک پاتوژن فرصت زیستی محسوب می شود, بنابراین از تجهیزات و وسایل محافظ شخصی مناسب استفاده کنید.

از جمله یک کابینت ایمنی بیولوژیکی برای پردازش نمونه ها.

 

جهت مشاهده قیمت انواع محیط کشت های مارک QUELAB لطفا به صفحه لیست قیمت سایت ما مراجعه فرمایید.

منبع : کمپانی شارلو ارایه دهنده انواع محیط کشت های میکروبی است.

برای اطلاع از  سایر محیط کشت های میکروبی  و همچنین قیمت محیط کشتها,

لطفا مطلب محیط کشت کیولب را مطالعه نمایید.

برای بدست آوردن اطلاعات بیشتر در مورد قیمت محیط کشت  به سایت شرکت کیمیا طب گستر مراجعه فرمایید

و لیست قیمت quelab  را مطالعه بفرمایید .

اگر به دنبال بهترین کیفیت محیط کشت‌ها‌ی میکروبی و سلولی با نازل‌ترین قیمت‌ها از معتبرترین کمپانی‌ها هستید

با کارشناسان شرکت کیمیا طب گستر تماس حاصل فرمایید.

شماره‌های تماس عبارتند از:

44276021 – 021

44276022 – 021

44276023 – 021

44276024 – 021

44276025 – 021

0912-1223103

0902-4809888 (پیام در واتساپ)

همچنین برای مشاهده دیگر محصولات ما لطفا به صفحه لیست قیمت مراجعه فرمایید.

برای امتیاز به این نوشته کلیک کنید!
[کل: 1 میانگین: 5]