جهت مشاوره با شماره 09121223103 تماس حاصل فرمائید
محیط  بایل اسکولین آگار

محیط بایل اسکولین آگار

  • 20کامنت
  • 2021/04/26
  • Admin
  • 13

محیط بایل اسکولین آگار

محیط بایل اسکولین آگار ,( BEA) محیط کشتی هم افتراقی ( به علت وجود اسکولین ) و هم انتخابی ( به علت وجود صفرا )  است.

همچنین محیط کشتی جامد است.

این محیط کشت اولین بار توسط Swan  در سال 1954 ابداع شد.

به علت وجود صفرا از رشد بقیه گرم مثبت ها به غیر از انتروکوک و استرپتوکوک D  و

همچنین برخی از گونه های استرپتوکوک ها جلوگیری می کنند.

اساس کار :

استرپتوکوک های گروه   D و انتروکوک ها توانایی تجزیه اسکولین را در حضور صفرا دارند و

آن ها را به اسکولتین و گلوکز تجزیه می کنند.

استرپتوکوک ها در حضور صفرا  رشد کرده  و اسکولین را به گلوکز و اسکولتین هیدرولیز می کند و

در نتیجه ارگانیسم هایی که مولکول های اسکولین را شکافته و از گلوکز آزاد شده استفاده می کنند ،

تامین انرژی آزاد شده را به محیط انتقال می دهند.

اسکولتین با کمک سیترات فریک به شکل کمپلکس قهوه ای تیره یا سیاه واکنش می دهند.

سیترات فریک در محیط برای تشکیل ترکیب آهنی فلزی که باعث تشکیل شیب آگار می شود و

به رنگ قهوه ای تیره تا  سیاه واکنش می دهد.

بتا دی گلوکز + اسکولتین ® اسکولین

ترکیب قهوه ای تا سیاه رنگ ®آهن ( فریک ) + اسکولتین

اسکولین در حضور صفرا هیدرولیز می شود و اسکولتین را ایجاد می کند.

وجود سدیم آزید از رشد باکتری های گرم منفی جلوگیری می کند.

 

محیط بایل اسکولین آگار

توضیح در ادامه :

نمونه مثبت : استرپتوکوکوس فکالیس ( هیدرولیز اسکولین در حضور صفرا و بیش از نیمی از محیط کشت به رنگ سیاه دیده می شود. ) نمونه منفی : استرپتوکوکوس پیوژنز ( اسکولین را در حضور صفرا هیدرولیز نمی کند و رنگ محیط کشت تغییری نمی کند و سیاه نمی شود. )

هدف :

محیط بایل اسکولین آگار برای افتراق استرتوکوک های گروه D و

انتروکوک ها  از استرپتوکوک های غیر گروه D به کار می رود.

استفاده از محیط کشت بایل اسکولین آگار روش مناسبی برای تشخیص  انتروکوک ها و

استرپتوکوک های گروه D از استرپتوکوک های غیر گروه D است. ( به علت وجود اسکولین و صفرا )

همچنین برای تفکیک گونه هایی از انتروباکتر ، کلبسیا ، اشرشیای کلای نیز به کار می رود.

لطفا به این نکته توجه شود که انتروکوک ها با استرپتوکوک های گروه  D فرق می کند.

به طوری قبلا  انتروکوک ها را جزو استرپتوکوک های گروه D قرار می گرفتند

اما با مطالعات جدید روی آن ها فهمیدند که دارای شاخصه های مجزایی می باشند و بسیار مقاوم است.

انتروکوک ها نوعی باکتری بی هوازی اختیاری است.

واکنش همولیز انتروکوک ها به صورت آلفا ، بتا و گاما می تواند باشد.

نسبت به 40% نمک های صفراوی مقاوم می باشد.

ویژگی های مهم آن ها عبارتند از :

  1. توانایی تحمل غلظت بالای نمک و رشد در محیط نمکی 6/5 % را دارد.
  2. توانایی هیدرولیز اسکولین را دارد.

استرپتوکوک ها کوکسی های گرم مثبت هستند  هوازی یا بی هوازی اختیاری هستند و

با آرایش زنجیره ای دو تایی کنار هم قرار گرفته اند که به عنوان فلور نرمال

در مخاط دستگاه تنفسی ، سیستم گوارشی و ادراری تناسلی وجود دارد.

به طور کلی استرپتوکوکوک ها برخلاف استافیلوکوکوس ها نیازمندی های تغذیه ای پیچیده ای دارند.

یعنی به محیط کشت آن ها باید مکمل اضافه شود به عنوان مثال خون و اسید آمینه.

ولی استافیلوکوک ها به راحتی روی محیط های معمولی رشد می کنند .

از بهترین محیط هایی که برای این باکتری ها به کار می رود محیط کشت بلاد آگار و شکلات آگار است .

این باکتری ها فاقد فلاژل هستند پس توانایی حرکت ندارند.

53 گونه از جنس استرپتوکوک ها تاکنون  شناسایی شده اند که بیشتر به عنوان

فلور نرمال غشای مخاطی به خصوص در ناحیه ی نازوفارنکس مطرح اند.

بر اساس ویژگی های سرولوژیک ( بر مبنای کربوهیدرات C ) استرپتوکوکوس ها را از A  تا U طبقه بندی می کنند.

گروه A : استرپوکوکوس پیوژنز ، استرپتوکوکوس آنجینوسوس (استرپتوکوکوس میلری )

گروه B : استرپتوکوکوس آگالاکتیه

گروه C : استرپتوکوکوس equi  ( اسب ) و equisimilis

گروه D : استرپتوکوکوس بوویس و انتروکوکوس

لازم به ذکر است که طبقه بندی استرپتوکوک ها به روش های مختلفی انجام می شود که

مهم ترین روش طبقه بندی ، بر اساس همولیز خون ( همولیتیک  ) است و

بر همین اساس استرپوکوک ها به دو دسته ی استرپتوکوک های بتا همولتیک ( اطراف کلونی هاله ی شفاف دیده می شود )

که شامل استرپتوکوک های گروه A و B است و گروه دیگر که

شامل استرپتوکوک های آلفا همولتیک و گاما همولتیک است تقسیم می شوند.

استرپتوکوک ها برخلاف استافیلوکوک ها نیاز های غذایی پیچیده ای دارند

یعنی باید به محیط کشت آن ها خون یا اسید آمینه اضافه کنیم.

محیط کشت بایل اسکولین آگار حاوی ترکیبات زیر است ( برحسب گرم در لیتر )

پپتون 3/00

تریپتون 17/000

عصاره جو 5/00

اگزال ( صفرای گاوی )  1/00

سدیم کلراید 5/00

سدیم سیترات 1/00

سدیم آزید 0/25

آگار 13/000

سیترات فریک 0/50

عصاره جو همانند بقیه محیط ها تامین کننده ی ویتامین های گروه B ،

سدیم کلراید نیز حفظ کننده ی حالت اسمزی محیط کشت است.

سیترات فریک به عنوان نشانگر استفاده می شود .

پپتون به عنوان منبع تامین کننده ی کربن ، نیتروژن و اسید های آمینه است.

سدیم آزید همان طور که پیش تر گفته شد مانع از رشد باکتری های گرم منفی می شود.

وجود صفرا مانع رشد باکتری های گرم مثبت می شود .

کنترل کیفیت :

استرپتوکوکوس فکالیس ATCC29212  : رشد می کند و اطراف کلنی سیاه می شود.

استرپتوکوکوس پیوژنز ATCC19615  : رشد به طور جزئی تا کامل مهار می شود.

استرپتوکوکوس ویریدانس : فاقد رشد و عدم تغییر رنگ محیط کشت

تهیه نمونه :

برای تهیه نمونه می توان از نمونه های بالینی ، نمونه مدفوع و نمونه های غذایی و لبنیاتی استفاده کرد.

مشخصات ظاهری :

محیط کشت غیر آماده : پودری شکل است و به رنگ زرد مایل به کرم دیده می شود.

دستورالعمل تهیه محیط بایل اسکولین آگار :

55/7 گرم از پودر محیط کشت را در 1000 میلی لیتر آب مقطر از پیش آماده شده

در ارلن مایر ترکیب کرده و اجازه دهید پودر کاملا حل شود.

سپس به مدت 1 الی 2 دقیقه محلول را روی چراغ الکلی یا بن ماری بجوشانید.

آنگاه  محلول را به مدت 15 دقیقه در اتوکلاو 121 درجه قرار داده تا محلول استریل شود.

سپس اجازه دهید محلول در دمای 40 الی 50 درجه خنک شود و حال محیط کشت آماده مصرف می باشد.

توجه شود که اگر محیط در لوله تهیه شده است ، باید سطح و عمق تلقیح شود.

و به مدت 18 الی 24 ساعت در دمای 37 انکوبه کنید.

قبل از استفاده از محیط کشت آن را در دمای اتاق بگذارید.

سیاه شدن محیط دلالت بر مثبت بودن نتیجه آزمایش دارد که اغلب در طی 4 ساعت ظاهر می شود.

نکته ی حائز اهمیت این است که همه ی استرپتوکوک های گروه D در طی 24 ساعت مثبت خواهند شد.

 

منبع : کمپانی شارلو ارایه دهنده انواع محیط کشت های میکروبی است.

برای اطلاع از  سایر محیط کشت های میکروبی  و همچنین قیمت محیط کشتها,

لطفا مطلب محیط کشت کیولب را مطالعه نمایید.

برای بدست آوردن اطلاعات بیشتر در مورد قیمت محیط کشت  به سایت شرکت کیمیا طب گستر مراجعه فرمایید

و لیست قیمت quelab  را مطالعه بفرمایید .

اگر به دنبال بهترین کیفیت محیط کشت‌ها‌ی میکروبی و سلولی با نازل‌ترین قیمت‌ها از معتبرترین کمپانی‌ها هستید

با کارشناسان شرکت کیمیا طب گستر تماس حاصل فرمایید.

شماره‌های تماس عبارتند از:

44276021 – 021

44276022 – 021

44276023 – 021

44276024 – 021

44276025 – 021

0912-1223103

0902-4809888 (پیام در واتساپ)

برای امتیاز به این نوشته کلیک کنید!
[کل: 0 میانگین: 0]